目的:针对单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)包膜糖蛋白gD和gB的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)表位,构建重组真核表达质粒pVAX-gD-CTL.方法:用PCR方法从已构建好的pc-gD真核表达质粒中扩增gD片段,将其与CTL表位共同连接到pVAX1载体,构建重组真核表达质粒pVAX-gD-CTL.采用免疫组化和Western-blotting法鉴定重组质粒的表达情况,免疫BALB/c小鼠,进行CTL活性鉴定.结果:构建的重组质粒能在非洲绿猴肾细胞(COS-7细胞)内表达.该重组DNA疫苗免疫接种BALB/c小鼠后,其CTL活性增高.结论:成功构建HSV-2 pVAX-gD-CTL重组真核表达质粒,并能在真核细胞内表达,该DNA疫苗对细胞免疫有明显的促进作用.
作者:关蕾;杨慧兰;樊建勇
来源:临床皮肤科杂志 2006 年 35卷 6期