目的 初步探讨自噬在脂质诱导的肾小管上皮细胞损伤中脂质聚集中的作用.方法 将HK-2细胞培养后,分为4组:0βg/ml组(A组)、20 μg/ml组(B组)、50μg/nnl组(C组)、100 μg/ml组(D组).分别用0 μg/ml、20 μg/ml、50βg/ml、100 μg/ml低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)刺激肾小管上皮细胞24 h,用油红O法检测细胞内中性脂质,通过透射电子显微镜下观察自噬体形成,荧光显微镜下观察LC3-GFP融合蛋白示踪自噬形成,Wester blotting检测LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ蛋白.结果 ①油红O显示在0～100 μg/m1浓度范围内LDL随浓度增高刺激细胞内脂质增多;②电镜显示正常HK-2细胞内可见少许自噬泡,在0～50 μg/ml浓度范围内随LDL刺激浓度增加,细胞内自噬泡逐渐增多,但达到一定浓度(即100 μg/ml)后自噬泡急剧减少;③正常HK-2细胞内可见少许LC3-GFP染色阳性,在0～50 μg/ml浓度范围内随LDL刺激浓度增加,细胞内LC3-GFP染色阳性逐渐增多,但达到一定浓度即100 μg/ml后LC3-GFP染色阳性急剧减少;④正常HK-2细胞内存在少量的LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ,但以LC3-Ⅰ为主,在0～50 μg/ml浓度范围内随LDL刺激浓度增加,LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ均增加,但LC3-Ⅱ增加更明显,50 μg/ml LDL组LC3-Ⅰ是0 μg/ml LDL组的2倍,LC3-Ⅱ表达是0μg/ml的3倍,差异有统计学

作者：王瑞；张宁

来源：临床肾脏病杂志 2016 年 16卷 9期