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目的 探讨Noxa基因与人肝癌的临床病理关系及对人肝癌HepG2细胞的增殖抑制和促凋亡作用.方法 采用免疫组化法检测100例肝癌组织及癌旁组织中Noxa蛋白的表达,结合其临床病理参数和随访资料进行统计学分析.同时利用脂质体将真核表达载体pIRES2-EGFP-Noxa瞬时转染至人肝癌HepG2细胞,RT-PCR检测转染后Noxa基因mRNA的表达,Westernblot法检测转染后Noxa蛋白表达,MTT比色法测定细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 免疫组化检测结果显示肝癌组织中Noxa阳性率为50%,明显低于癌旁正常肝组织(78%),两组相比差异有显著性(P<0.05).Noxa蛋白表达与肝癌分化程度及TNM分期有关(P<0.05).HepG2细胞中成功表达Noxa基因,转染后mRNA及蛋白表达随时间延长持续上升,差异有统计学意义(P<0.05).与其它各组相比,转染24、48、72 h后,其吸光度值逐渐升高(P<0.05),流式细胞仪检测结果显示,其24 h、48 h、72 h凋亡率分别为(15.5±0.9)%、(24.6±0.8)%和(35.4±0.7)%,组间差异有统计学意义(P<0.05).结论 Noxa表达与肝癌分化程度及TNM分期密切相关,其高表达可抑制人肝癌细胞HepG2的增殖并促进其凋亡.

作者:朱卫东;郭凌川

来源:临床与实验病理学杂志 2017 年 33卷 2期

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作者:
朱卫东;郭凌川
来源:
临床与实验病理学杂志 2017 年 33卷 2期
标签:
肝肿瘤 肝细胞癌 Noxa HepG2 凋亡 转染 liver neoplasms hepatocellular carcinoma Noxa HepG2 apoptosis transfection
目的 探讨Noxa基因与人肝癌的临床病理关系及对人肝癌HepG2细胞的增殖抑制和促凋亡作用.方法 采用免疫组化法检测100例肝癌组织及癌旁组织中Noxa蛋白的表达,结合其临床病理参数和随访资料进行统计学分析.同时利用脂质体将真核表达载体pIRES2-EGFP-Noxa瞬时转染至人肝癌HepG2细胞,RT-PCR检测转染后Noxa基因mRNA的表达,Westernblot法检测转染后Noxa蛋白表达,MTT比色法测定细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 免疫组化检测结果显示肝癌组织中Noxa阳性率为50%,明显低于癌旁正常肝组织(78%),两组相比差异有显著性(P<0.05).Noxa蛋白表达与肝癌分化程度及TNM分期有关(P<0.05).HepG2细胞中成功表达Noxa基因,转染后mRNA及蛋白表达随时间延长持续上升,差异有统计学意义(P<0.05).与其它各组相比,转染24、48、72 h后,其吸光度值逐渐升高(P<0.05),流式细胞仪检测结果显示,其24 h、48 h、72 h凋亡率分别为(15.5±0.9)%、(24.6±0.8)%和(35.4±0.7)%,组间差异有统计学意义(P<0.05).结论 Noxa表达与肝癌分化程度及TNM分期密切相关,其高表达可抑制人肝癌细胞HepG2的增殖并促进其凋亡.