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目的 探讨微小RNA-152(miR-152)对乳腺癌细胞阿霉素敏感性的影响及其作用机制.方法 采用实时定量PCR(QPCR)检测人乳腺上皮细胞株HBL-100、人乳腺癌MCF-7细胞及阿霉素耐药株MCF-7/ADR细胞中的miR-152水平,分别向MCF-7细胞和MCF-7/ADR细胞转染miR-152模拟物mimics(过表达组)和阴性对照NC(阴性对照组),以未行转染为空白对照组.采用QPCR检测转染后MCF-7细胞和MCF-7/ADR细胞中miR-152的表达情况,采用MTT法检测不同浓度阿霉素(10、50、100、200和500 ng/ml)处理后各组的增殖情况,流式细胞术检测转染后各组的凋亡率,Western blotting检测磷脂酰肌醇激酶-3催化亚基α基因(PIK3CA)的蛋白水平,双荧光素酶报告实验评价miR-152对PIK3CA的靶向调控作用.结果 QPCR实验结果表明MCF-7细胞和MCF-7/ADR细胞中的miR-152水平均低于HBL-100细胞,且MCF-7/ADR细胞的miR-152水平均低于MCF-7细胞,差异有统计学意义(P<0.05);过表达组转染后的miR-152水平均高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05).与其余两组比较,过表达组的存活率降低而凋亡率升高,且PIK3CA蛋白水平也降低,差异有统计学意义(P<0.05).miR-152可抑制野生型PIK3CA 3'UTR报告基因载体的荧光素酶活性,而对突变型PIK3CA 3'UTR的荧光素酶活性无影响.结论 miR-152表达在乳腺

作者:杨秀丽;沈玲

来源:临床肿瘤学杂志 2018 年 23卷 5期

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作者:
杨秀丽;沈玲
来源:
临床肿瘤学杂志 2018 年 23卷 5期
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乳腺癌 微小RNA-152 磷脂酰肌醇激酶-3催化亚基α基因(PIK3CA) 阿霉素
目的 探讨微小RNA-152(miR-152)对乳腺癌细胞阿霉素敏感性的影响及其作用机制.方法 采用实时定量PCR(QPCR)检测人乳腺上皮细胞株HBL-100、人乳腺癌MCF-7细胞及阿霉素耐药株MCF-7/ADR细胞中的miR-152水平,分别向MCF-7细胞和MCF-7/ADR细胞转染miR-152模拟物mimics(过表达组)和阴性对照NC(阴性对照组),以未行转染为空白对照组.采用QPCR检测转染后MCF-7细胞和MCF-7/ADR细胞中miR-152的表达情况,采用MTT法检测不同浓度阿霉素(10、50、100、200和500 ng/ml)处理后各组的增殖情况,流式细胞术检测转染后各组的凋亡率,Western blotting检测磷脂酰肌醇激酶-3催化亚基α基因(PIK3CA)的蛋白水平,双荧光素酶报告实验评价miR-152对PIK3CA的靶向调控作用.结果 QPCR实验结果表明MCF-7细胞和MCF-7/ADR细胞中的miR-152水平均低于HBL-100细胞,且MCF-7/ADR细胞的miR-152水平均低于MCF-7细胞,差异有统计学意义(P<0.05);过表达组转染后的miR-152水平均高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05).与其余两组比较,过表达组的存活率降低而凋亡率升高,且PIK3CA蛋白水平也降低,差异有统计学意义(P<0.05).miR-152可抑制野生型PIK3CA 3'UTR报告基因载体的荧光素酶活性,而对突变型PIK3CA 3'UTR的荧光素酶活性无影响.结论 miR-152表达在乳腺