目的 探讨长链非编码RNA RP11-273G15.2靶向调控微小RNA-9-5p(miR-9-5p)表达及对肝癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 采用GEPIA分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库中269例肝癌组织和50例正常组织的RP11-273G15.2水平;实时定量PCR(qPCR)检测正常人肝细胞HL-7702和肝癌细胞(SMMC-7721、HepG2和BEL-7404)的RP11-273G15.2水平,构建过表达RP11-273G15.2的pcDNA3.1质粒并采用脂质体转染SMMC-7721细胞(过表达组),同时设未行转染的细胞为空白对照组和转染空载pcDNA3.1质粒的阴性对照组.采用qPCR、噻唑蓝(MTT)比色法和Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测RP11-273G15.2水平、细胞活力和凋亡率,qPCR和Western blotting检测凋亡相关因子的表达情况,利用LncBase Pre-dicted v.2在线预测RP11-273G15.2可能结合的下游miRNAs并筛选miR-9-5p为研究目标,构建pGL3荧光素酶报告载体并采用双荧光素酶报告分析系统验证RP11-273G15.2对miR-9-5p的结合能力.结果 GEPIA分析结果 显示,269例肝癌组织的RP11-273G15.2水平低于50例正常组织(P<0.05).肝癌细胞的RP11-273G15.2水平均低于HL-7702细胞(P<0.05),选取RP11-273G15.2水平最低的SMMC-7721细胞进行后续过表达实验;与其余两组相比,过表达组的RP11-273G15.2水平升高而miR-9-5p水平降低且
作者:刘艳;沈涛;黄媚;凌丽华
来源:临床肿瘤学杂志 2020 年 25卷 5期