目的 观察还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)对治疗2型糖尿病药物淀粉酶抑肽(Tendamistat)小分子蛋白质氨基酸链折叠过程的影响.方法 设计四组Tendamistat的复性折叠实验,按照不同浓度及比例加入GSH与GSSG,进行Tendamistat的再氧化复性折叠反应.然后采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,分离在复性折叠过程中出现的并且用碘乙酰胺捕捉的折叠中间体及复性产物,显示其在不同实验条件下的变化,观察GSH与GSSG的浓度配比变化对Tendamistat再氧化复性折叠的影响.结果 当GSH与GSSG的实验浓度分别为1mmol·L-1和0.1 mmol·L-时,出现规范型折叠中间体和复性产物；保持GSSG的浓度0.1 mmol·L-不变,GSH的浓度在0.1mmol·L-1到10mmol·L-之间变化,可促进折叠,但若其浓度继续增加,则折叠中间体消失,折叠过程被抑制中断；当GSH的浓度为0.1mmol·L-不变时,逐渐增加GSSG的浓度,会导致出现不规范及错误折叠中间体；根据以上三组实验结果选定的1 mmol·L-GSH和0.1mmol·L-1 GSSG作为复性反应条件,可使变性还原Tendamistat在2h内再氧化重折叠复性.结论 变性还原Tendamistat的复性重折叠涉及到其4个半胱氨酸残基经再氧化形成两个二硫键的过程,GSH/GSSG氧化还原电对不可缺少,其正确复性折叠及天然二硫键的重新连接,则
作者：刘姝谣；何兰杰；韩思梗
来源：宁夏医科大学学报 2013 年 35卷 6期
