目的 探讨以睾丸注射法和慢病毒载体法相结合建立转基因动物的方法.方法 用三质粒慢病毒载体系统和pSico-eGFP表达载体转染293TN细胞,包装慢病毒,转染后裂解细胞,收集携带绿色荧光蛋白(EGFP)基因的慢病毒.将30μL含1×TransDux和1%台盼蓝的病毒液2×107(U·nmL-1)注射到成年C57BL/6J小鼠睾丸网内,根据小鼠精子形成周期,分别于注射后第7、15、30和42天与发情母鼠合笼.利用EGFP观察灯检测仔代转基因小鼠阳性率.结果 该种方法制备转基因荧光小鼠成功,而且在注射后30天配种,产生的转基因小鼠阳性率最高,达35%.结论 该方法简单,易于操作,能够有效制备转基因小鼠.
作者:冉林武;张文文;荣瑞奇;姚涛贵;杨文;陈健茂;李红兵
来源:宁夏医科大学学报 2017 年 39卷 1期