为探讨不同转染试剂(LipofectamineTM LTX&PLUSTM、Lipofectamine2000和纳米化聚酰胺-胺型树枝状聚合物(PAMAM-D))和睾丸注射方法(睾丸网注射、曲精细管注射和间质注射)对转基因小鼠生产效率的影响,将pEGFP-C1质粒分别与不同转染试剂混合后,按照不同的注射方法注入小鼠睾丸内,30d后检测小鼠精子密度、活力、精子阳性率以及配种后仔鼠转基因阳性率.结果3种转染试剂对小鼠繁殖性能影响由小到大依次为LipofectamineTM LTX&PLUSTM、Lipofectamine 2000和PAMAM-D.转染后LipofectamineTM LTX&PLUSTM、Lipofectamine 2000和PAMAM-D组精子的GFP阳性率分别为35.65％±0.69％、12.86％±0.35％和10.04％±0.20％.配种后仔鼠的PCR阳性率分别为29.17％、13.70％和5.88％.3种不同注射方法对小鼠睾丸都造成损伤,由小到大依次为睾丸网注射、曲精细管注射和睾丸间质注射,三者的阳性精子比例分别为35.13％±1.727％、15.13％±1.457％和0％,配种后仔鼠的PCR阳性率分别为33.3％、12.5％和0％.结果表明,LipofectamineTM LTX&PLUSTM和睾丸网注射对小鼠睾丸的损伤最小,并能获得较高的转染效率.
作者：戴建军；李翔；吴彩凤；张树山；张廷宇；张德福
来源：生物工程学报 2014 年 30卷 10期
