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目的 构建针对Livin基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达载体,探讨其对肝肿瘤HepG2细胞化疗敏感性的影响.方法 设计并构建针对Livin基因的shRNA真核表达载体pSD11-U6/Neo/GFP/Livin,脂质体法转染肝肿瘤HepG2细胞.荧光定量PCR、Western blotting检测细胞LivinmRNA和蛋白的相对表达水平.顺铂(2.0 mg/L)处理后,MTT法检测细胞生长抑制率.结果 测序分析证实针对Livin基因的shRNA真核表达载体构建成功,转染肝肿瘤HepG2细胞后可降低Livin mRNA和蛋白的相对表达量(P<0.05),顺铂对转染Livin表达载体的HepG2细胞抑制率明显高于未转染细胞(P<0.05).结论 成功构建Livin shRNA真核表达载体,且有效抑制HepG2细胞中Livin基因的表达,增强肝肿瘤细胞对化疗药物的敏感性.

作者:徐威;常宏;翟云鹏

来源:山东大学学报(医学版) 2013 年 51卷 12期

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作者:
徐威;常宏;翟云鹏
来源:
山东大学学报(医学版) 2013 年 51卷 12期
标签:
Livin基因 RNA干扰 肝细胞肝肿瘤 Livin gene RNA interference Hehapocellular neoplasm
目的 构建针对Livin基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达载体,探讨其对肝肿瘤HepG2细胞化疗敏感性的影响.方法 设计并构建针对Livin基因的shRNA真核表达载体pSD11-U6/Neo/GFP/Livin,脂质体法转染肝肿瘤HepG2细胞.荧光定量PCR、Western blotting检测细胞LivinmRNA和蛋白的相对表达水平.顺铂(2.0 mg/L)处理后,MTT法检测细胞生长抑制率.结果 测序分析证实针对Livin基因的shRNA真核表达载体构建成功,转染肝肿瘤HepG2细胞后可降低Livin mRNA和蛋白的相对表达量(P<0.05),顺铂对转染Livin表达载体的HepG2细胞抑制率明显高于未转染细胞(P<0.05).结论 成功构建Livin shRNA真核表达载体,且有效抑制HepG2细胞中Livin基因的表达,增强肝肿瘤细胞对化疗药物的敏感性.