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目的:探讨哈尔明碱对人白血病HL-60细胞增殖的抑制作用及机制。方法不同浓度哈尔明碱作用于白血病HL-60细胞,MTS法观察哈尔明碱对HL-60细胞增殖的影响,流式细胞仪检测哈尔明碱对HL-60细胞周期的影响,Western blotting、RT-PCR法分别检测哈尔明碱对HL-60细胞STGC3、CDK1、p27、p53、p-AKT蛋白、mRNA表达的变化,报告基因技术考察哈尔明碱对HL-60细胞NF-κB和AP-1转录活性的影响,ELISA技术检测哈尔明碱对HL-60细胞细胞因子TGF-β、IL-1、IL-6和IL-8水平影响。结果哈尔明碱作用后,HL-60细胞增殖被抑制,呈剂量依赖性。1、2μg/mL哈尔明碱作用后,HL-60细胞G0/G1期细胞增多且S期、G2/M期细胞减少,CDK1、p-AKT蛋白表达下降,STGC3、p27和p53蛋白表达升高,CDK1 mRNA表达下降,STGC3、p27、p53 mRNA表达升高,NF-κB和AP-1转录活性下降,细胞因子表达均下降(P均<0.05)。结论哈尔明碱可抑制HL-60细胞的增殖能力,其机制可能与下调CDK1并上调STGC3、p27、p53的表达,抑制细胞TGF-β、IL-1β、IL-6、IL-8等炎症细胞因子的分泌以及NF-κB和AP-1的转录活性有关。

作者:孙亚军;张春德

来源:山东医药 2014 年 27期

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作者:
孙亚军;张春德
来源:
山东医药 2014 年 27期
标签:
哈尔明碱 白血病 HL-60细胞 细胞增殖 细胞凋亡 harmine leukemia HL-60 cells cell proliferation apoptosis
目的:探讨哈尔明碱对人白血病HL-60细胞增殖的抑制作用及机制。方法不同浓度哈尔明碱作用于白血病HL-60细胞,MTS法观察哈尔明碱对HL-60细胞增殖的影响,流式细胞仪检测哈尔明碱对HL-60细胞周期的影响,Western blotting、RT-PCR法分别检测哈尔明碱对HL-60细胞STGC3、CDK1、p27、p53、p-AKT蛋白、mRNA表达的变化,报告基因技术考察哈尔明碱对HL-60细胞NF-κB和AP-1转录活性的影响,ELISA技术检测哈尔明碱对HL-60细胞细胞因子TGF-β、IL-1、IL-6和IL-8水平影响。结果哈尔明碱作用后,HL-60细胞增殖被抑制,呈剂量依赖性。1、2μg/mL哈尔明碱作用后,HL-60细胞G0/G1期细胞增多且S期、G2/M期细胞减少,CDK1、p-AKT蛋白表达下降,STGC3、p27和p53蛋白表达升高,CDK1 mRNA表达下降,STGC3、p27、p53 mRNA表达升高,NF-κB和AP-1转录活性下降,细胞因子表达均下降(P均<0.05)。结论哈尔明碱可抑制HL-60细胞的增殖能力,其机制可能与下调CDK1并上调STGC3、p27、p53的表达,抑制细胞TGF-β、IL-1β、IL-6、IL-8等炎症细胞因子的分泌以及NF-κB和AP-1的转录活性有关。