目的：探讨miR-506对结肠癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法将结肠癌细胞SW620随机分为四组，分别转染 pcDNA3空载体（ pcDNA3组）、miR-506过表达质粒 pcDNA3／pri-506（ miR-506组）、pSIH1空载体（pSIH1组）及miR-506抑制表达质粒pSIH1／TuD-506（TuD-506组）。采用qRT-PCR法检测各组miR-506 mRNA的相对表达量，CCK-8法检测各组的细胞活性，集落形成试验检测各组的集落形成能力。采用生物信息学软件预测miR-506的潜在靶基因，荧光报告载体试验验证结肠癌细胞SW620中miR-506对靶基因mRNA的调控作用。采用qRT-PCR法和Western blotting法检测miR-506对靶基因mRNA及其蛋白表达的影响。结果与pcDNA3组比较， miR-506组miR-506 mRNA的相对表达量明显升高，而细胞活性、集落形成能力明显减弱（ P均＜0．01）；TuD-506组与pSIH1组miR-506 mRNA的相对表达量、细胞活性、集落形成能力比较差异均无统计学意义（P均＞0．05）。生物信息学软件预测发现，层黏连蛋白γ1（LAMC1）是miR-506的潜在靶基因，经荧光报告载体试验验证，miR-506能够直接作用于LAMC1 mRNA并负性调控其表达。 miR-506组LAMC1 mRNA及其蛋白的相对表达量均低于pcDNA3组（P均＜0．05），TuD-506组与pSIH1组LAMC1 mRNA及其蛋白的相对表达量比较

作者：祖彩华；张国梁；刘涛

来源：山东医药 2016 年 56卷 40期