目的 构建SND1低表达的人宫颈癌CasKi细胞稳定株,探讨SND1低表达对CasKi细胞生物学功能的影响.方法 CasKi细胞随机分为六组,空白对照组不做处理,阴性对照组、干扰1~4组分别转染TRC2-pLKO-puro Vector的空载慢病毒液及SND1 shRNA(1~4)慢病毒液,用嘌呤霉素筛选CasKi细胞稳定株.分别用Western blotting技术、RT-PCR技术检测CasKi细胞内SND1蛋白、mRNA表达,确认转染效率.用CCK-8法检测CasKi细胞增殖活力(OD450值),用细胞划痕实验检测CasKi细胞相对迁移距离.结果 空白对照组细胞全部死亡,阴性对照组及干扰1~4组细胞部分存活,证明细胞稳定株转染构建成功.干扰1~4组SND1蛋白、mRNA相对表达量与空白对照组、阴性对照组比较,P均<0.05;干扰3、4组与其他组比较,P均<0.05.干扰3、4组OD450值、相对迁移距离与空白对照组、阴性对照组比较,P均<0.05.结论 成功构建了SND1低表达的CasKi细胞稳定株;SND1低表达的CasKi细胞增殖和迁移能力降低.
作者：孟浩；付晓；张春燕；辛灵彪；任媛媛；杨洁；何津岩
来源：山东医药 2017 年 57卷 21期
