目的:探讨结核分枝杆菌融合蛋白Ag85B-Hsp16.3、Ag85B-ESAT6及分泌蛋白Hsp16.3对人肝癌细胞HepG-2的作用.方法:将已构建的舍3种目的基因的表达载体pProEXHTa-Ag85B-Hsp16.3、pProEXHTa-Ag85B-ESAT6和pProEXHTb-Hsp16.3.分别转入宿主菌E.coli DH5α中,诱导表达后分别获得Ag85B-Hsp16.3、Ag85B-ESAT6和Hsp16.3三种蛋白,采用Ni2+亲和层析柱进行纯化,并用透析方法进行目的蛋白的复性.复性的蛋白按照不同浓度和作用时间分别与肝癌细胞HepG-2反应,用MTT法检测细胞生长情况.结果:三种蛋白被成功纯化并复性.MTT数据统计分析显示,终浓度10ng/ml的三种蛋白对HepG-2细胞生长没有明显作用,当三种蛋白的终浓度分别为20、40、80μg/ml时均能够抑制HepG-2细胞的生长,并且抑制作用随着蛋白终浓度的增大以及作用时间的延长而增强.不同类别的蛋白抑制作用没有明显差别.结论:结核分枝杆菌的部分分泌蛋白能够抑制肝癌细胞HepG-2的生长.
作者：杨巍；师长宏；张彩勤；赵勇；赵善民；赵佐庆
来源：现代生物医学进展 2011 年 11卷 10期
