目的:构建稳定表达p120ctn的A549细胞株,以研究p120ctn蛋白在肺癌发生和转移过程中的作用.方法:通过分子克隆,将pcDNA3.1多克隆位点插入Flag标签的编码序列,得到pcDNA.Flag表达载体.然后PCR扩增p120ctn的编码序列,插入Flag标签下游,构建pcDNA.Flag-p 120ctn质粒,筛选阳性克隆并进行酶切及测序鉴定.利用脂质体Lipofectamine 2000将pcDNA.Flag-p120ctn质粒转染到肺癌细胞A549中,通过G418筛选得到稳定转染细胞株,免疫印迹法检测p120ctn的表达.结果:本文构建了融合有Flag标签的p120ctn真核表达载体并转染到A549中,免疫印迹结果表明p120ctn蛋白在A549细胞中高效的表达.结论:本文成功构建了稳定高表达p120ctn的A549细胞模型,为深入研究p120ctn在肺癌的发生和转移过程中的作用奠定了基础.
作者：毕传林；刘海艳；韩翠芳；张信玲；顾玉超
来源：现代生物医学进展 2015 年 15卷 2期
