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目的:研究瘦素对大鼠主动脉内皮细胞RAECs)环氧化酶-2(COX-2)及其下游产物前列环素和血栓素A2表达的影响.方法:酶消化法分离RAECs;免疫荧光检测细胞Ⅷ因子的表达;实时荧光定量PCR检测不同浓度瘦素(10-10M、10母M、10-8M)和时间(36h、48 h)处理后对RAECs COX-2 mRNA表达的影响;Westemblot检测各组COX-2蛋白的改变;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组细胞上清液中6-酮前列腺素F1α(6-Keto PGF1 α)和血栓素B2(TXB2)的水平.结果:酶消化法6天后见细胞呈长梭形或多边形,培养10天后细胞呈典型的“铺路石”样改变,免疫荧光检测发现Ⅷ因子在胞浆中特异性表达,内皮细胞纯度达90%.与对照组(PBS处理)相比较,瘦素处理后,各组大鼠主动脉内皮细胞COX-2 mRNA及蛋白表达量均有升高趋势,两者表达量均随浓度增加和处理时间延长而升高(P<0.05).而6-Keto PGF1α水平升高及TXB2/6-Keto PGF1α比例降低仅见于相对高浓度瘦素(10-9、10-8M)处理后(P<0.05),但瘦素对RAECs TXB2表达无影响(P>0.05).结论:瘦素增加RAECs炎性标志物COX-2及其下游舒张血管产物6-Keto PGF1 α的表达,降低TXB2(收缩血管物质)/6-Keto PGF1 α比例.COX-2可能在瘦素介导的高血压发病中起重要作用,但因其下游产物则有利于血管舒张,故选择性COX-2抑制剂可能会

作者:陈岳林;聂亚;方圆;陈钟欣;沈粤春

来源:现代生物医学进展 2016 年 16卷 4期

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作者:
陈岳林;聂亚;方圆;陈钟欣;沈粤春
来源:
现代生物医学进展 2016 年 16卷 4期
标签:
瘦素 内皮细胞 环氧化酶-2 前列环素 血栓素 Leptin Endothelial cells COX-2 Prostacyclin Thromboxane
目的:研究瘦素对大鼠主动脉内皮细胞RAECs)环氧化酶-2(COX-2)及其下游产物前列环素和血栓素A2表达的影响.方法:酶消化法分离RAECs;免疫荧光检测细胞Ⅷ因子的表达;实时荧光定量PCR检测不同浓度瘦素(10-10M、10母M、10-8M)和时间(36h、48 h)处理后对RAECs COX-2 mRNA表达的影响;Westemblot检测各组COX-2蛋白的改变;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组细胞上清液中6-酮前列腺素F1α(6-Keto PGF1 α)和血栓素B2(TXB2)的水平.结果:酶消化法6天后见细胞呈长梭形或多边形,培养10天后细胞呈典型的“铺路石”样改变,免疫荧光检测发现Ⅷ因子在胞浆中特异性表达,内皮细胞纯度达90%.与对照组(PBS处理)相比较,瘦素处理后,各组大鼠主动脉内皮细胞COX-2 mRNA及蛋白表达量均有升高趋势,两者表达量均随浓度增加和处理时间延长而升高(P<0.05).而6-Keto PGF1α水平升高及TXB2/6-Keto PGF1α比例降低仅见于相对高浓度瘦素(10-9、10-8M)处理后(P<0.05),但瘦素对RAECs TXB2表达无影响(P>0.05).结论:瘦素增加RAECs炎性标志物COX-2及其下游舒张血管产物6-Keto PGF1 α的表达,降低TXB2(收缩血管物质)/6-Keto PGF1 α比例.COX-2可能在瘦素介导的高血压发病中起重要作用,但因其下游产物则有利于血管舒张,故选择性COX-2抑制剂可能会