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采用分批补料的方法高密度培养重组大肠杆菌C600/pBV-TRAIL制备人可溶性TRAIL蛋白,优化发酵工艺,探索简单高效的分离纯化方法并测定蛋白生物活性.通过比较几种不同的补料策略:间歇流加、DO-stat、pH-stat,摸索了一种流加策略,即DO-stat-pH-stat组合流加,有效的避免了发酵过程中,尤其是诱导表达阶段乙酸积累的增加,使TRAIL蛋白在高密度培养条件下,得到高效表达.菌体密度最终达到300g/L(WCW)以上,可溶性TRAIL蛋白占菌体总蛋白的4.2

作者:章越;沈亚领;夏小霞;孙爱友;魏东芝;周劲松;张国钧;王梁华;焦炳华

来源:生物工程学报 2004 年 20卷 3期

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作者:
章越;沈亚领;夏小霞;孙爱友;魏东芝;周劲松;张国钧;王梁华;焦炳华
来源:
生物工程学报 2004 年 20卷 3期
标签:
重组大肠杆菌 分批补料 发酵 TRAIL 分离纯化
采用分批补料的方法高密度培养重组大肠杆菌C600/pBV-TRAIL制备人可溶性TRAIL蛋白,优化发酵工艺,探索简单高效的分离纯化方法并测定蛋白生物活性.通过比较几种不同的补料策略:间歇流加、DO-stat、pH-stat,摸索了一种流加策略,即DO-stat-pH-stat组合流加,有效的避免了发酵过程中,尤其是诱导表达阶段乙酸积累的增加,使TRAIL蛋白在高密度培养条件下,得到高效表达.菌体密度最终达到300g/L(WCW)以上,可溶性TRAIL蛋白占菌体总蛋白的4.2