本研究构建了两种高效表达可溶性重组蛋白的原核表达栽体.一种载体由HisSUMO序列与pET30a(+)栽体连接而成(命名为HisSUMO Express),表达的融合蛋白用Ni-NTA纯化,用SUMO蛋白酶Ⅰ切割后可获得不留任何残基的重组蛋白.SUMO-蛋白酶Ⅰ价格较贵,为减少表达蛋白的成本,第二种载体即在His-SUMO和目的序列之间加入羟胺切割位点(命名为HisSUMO Economic).在HisSUMO Economic中表达的融合蛋白用Ni-NTA纯化,羟胺液切割后可获得仅留一个甘氨酸残基的重组蛋白.以在常规表达载体中难以表达的鼠源成纤维细胞生长因子-21(mFGF-21)为例,经葡萄糖消耗实验检测其活性,验证两种表达载体的效果.结果表明mFGF-21在两种载体中均获得了高效表达,融合蛋白占菌体总蛋白的40
作者：姜媛媛；刘铭瑶；任桂萍；朱慧萌；李德山
来源：生物工程学报 2010 年 26卷 1期
