枯草芽孢杆菌是主要的核黄素工业生产菌之一,高通量筛选技术是选育获得高产核黄素菌株的关键环节.为实现工业菌种选育与高通量筛选技术相结合,对流式细胞分选、液滴微流控分选和96孔板筛选在核黄素工业菌株筛选中的应用进行了研究,并对96孔板筛选方法进行了优化.在流式细胞分析中,来源于同一株工业菌的低产菌株P1与高产菌株R1的细胞荧光与核黄素产量不成正相关.在液滴微流控分析中,P1和R1的发酵液上清荧光与核黄素产量成正相关,然而液滴分选后活细胞的数量很少.在96孔板筛选实验中,振荡培养后P1和R1的发酵液荧光分别为22264 a.u.、28647 a.u.;静置培养后荧光分别为7095 a.u.、10189 a.u.,核黄素产量与荧光成正相关,且二者荧光差异显著.利用96孔板静置培养的方法对工业菌株S1的突变体库进行筛选,得到的优选菌株核黄素产量为2.53 g/L,相比S1提高了15％.这些结果表明96孔板静置培养-荧光检测筛选可以应用于核黄素工业生产菌产量的提高.
作者：付首颖；夏苗苗；张祎凝；刘川；涂然；张大伟
来源：生物技术通报 2020 年 36卷 4期
