目的:克隆p53基因的启动子,插入萤光素酶报告基因载体,并检测启动子活性.方法:采用PCR技术从人肝癌细胞系HepG2基因组中扩增人p53启动子,插入萤光素酶报告基因载体pGL4.0-empty,将重组质粒转染293T、ZR75-1、HepG2、A549细胞,测定p53启动子的转录活性.结果:构建了p53启动子的萤光素酶报告基因;通过测序及质粒酶切鉴定,所构建的p53启动子正确;活性实验表明,报告基因在多种细胞中显示构建的p53启动子活性,并呈现一定的剂量效应;转录因子USF能以剂量效应方式提高p53报告基因的转录活性.结论:克隆了人p53启动子,为进一步研究调控p53的转录因子奠定了基础.
作者：刘家宏；徐小洁；符静；范忠义；吕朝晖；陆菊明；肖文华；叶棋浓；朱建华
来源：生物技术通讯 2013 年 1期
