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目的 观察MAPK/ERK kinase(MEK)抑制剂PD98059对人胆管癌细胞Fas配体(Fas ligand, FasL)表达的影响及其作用机制.方法 用RT-PCR和Western bolt检测PD98059处理组及未处理组人胆管癌细胞(QBC939)中c-Myc、p-c-Myc和FasL的表达;构建含FasL基因启动子的荧光素酶报告基因质粒,瞬时转染人胆管癌细胞,用PD98059处理后,检测荧光素酶相对活性,比较启动子活性的变化情况;染色质免疫共沉淀(ChIP)技术分析p-c-Myc和FasL基因启动子的结合情况.结果 PD98059处理组胆管癌细胞磷酸化c-Myc(p-c-Myc)和FasL的表达均明显降低,而c-Myc未见明显变化;人胆管癌活细胞中p-c-Myc与FasL基因启动子有结合;PD98059处理组胆管癌细胞荧光素酶活性与对照组相比下降约80

作者:段世刚;李大江;陈龙;刘子佩;王曙光

来源:第三军医大学学报 2010 年 32卷 3期

知识库介绍

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作者:
段世刚;李大江;陈龙;刘子佩;王曙光
来源:
第三军医大学学报 2010 年 32卷 3期
标签:
转录因子 Fas配体 启动子活性 报告基因 PD98059 transcription factor Fas ligand promoter activity reporter gene PD98059
目的 观察MAPK/ERK kinase(MEK)抑制剂PD98059对人胆管癌细胞Fas配体(Fas ligand, FasL)表达的影响及其作用机制.方法 用RT-PCR和Western bolt检测PD98059处理组及未处理组人胆管癌细胞(QBC939)中c-Myc、p-c-Myc和FasL的表达;构建含FasL基因启动子的荧光素酶报告基因质粒,瞬时转染人胆管癌细胞,用PD98059处理后,检测荧光素酶相对活性,比较启动子活性的变化情况;染色质免疫共沉淀(ChIP)技术分析p-c-Myc和FasL基因启动子的结合情况.结果 PD98059处理组胆管癌细胞磷酸化c-Myc(p-c-Myc)和FasL的表达均明显降低,而c-Myc未见明显变化;人胆管癌活细胞中p-c-Myc与FasL基因启动子有结合;PD98059处理组胆管癌细胞荧光素酶活性与对照组相比下降约80