目的 观察敲低Geminin对人脑胶质瘤细胞放疗敏感性的影响.方法 利用GEPIA和CGGA数据库分析Geminin在脑胶质瘤组织中的表达及与生存期的相关性.实验分为两组:si-GL2组(对照组)和si-Gem组(干扰组),设计siRNA干扰序列(si-Gem)和阴性对照序列(si-GL2),分别转染脑胶质瘤细胞LN229和U87,qRT-PCR和Western blot检测转染效率及蛋白表达水平.流式细胞术检测碘化丙啶(PI)染色后DNA含量分布,进而分析敲低Geminin对DNA再复制的影响.通过Annexin V-FITC/PI法,用流式细胞术检测敲低Geminin对细胞凋亡的影响.CCK-8细胞增殖实验检测敲低Geminin对胶质瘤细胞LN229和U87放疗敏感性的影响.Western blot检测Geminin相关分子Cdt1和DNA相关损伤蛋白γ-H2AX的表达水平.结果脑胶质瘤组织中Geminin的表达水平高于癌旁正常组织,且Geminin表达越高,脑胶质瘤患者预后越差(P<0.05).与si-GL2组相比,si-Gem组Geminin在LN229和U87细胞中的表达降低(P<0.05).与si-GL2组相比,si-Gem组敲低Geminin可诱导脑胶质瘤细胞出现DNA再复制表型、细胞凋亡比例显著增加(P<0.05),脑胶质瘤细胞对放疗敏感性增强(P<0.05).与si-GL2组相比,si-Gem组Geminin相关分子Cdt1蛋白表达水平降低,γ-H2AX的蛋白表达水平升高.结论 敲低Geminin可以诱导脑胶质瘤细胞
作者:贺维;潘鹭翔;韩宇晨;邹彦琦;顾锦涛;贾博;刘骁;曹正聪;姜雨然;张阔;张旺倩;王舒宁;李萌;张英起;郝强
来源:山西医科大学学报 2023 年 54卷 1期