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目的:探讨在喉癌细胞株Hep-2中上调miRNA let-7a的表达对高迁移率族蛋白(high mobility group A,HMGA2)的作用机制以及对喉癌细胞增殖的影响.方法:合成miRNA let-7a模拟体(let-7a mim-ics)并采用阳离子脂质体法转染入Hep-2内;分别用流式细胞术和MTT法检测let-7a高表达对细胞凋亡和增殖的影响;实时荧光PCR(Real-time qPCR)和Western blot检测上调let-7a后对HMGA2表达的影响.结果:本实验将let-7a mimics成功转染入Hep-2内,流式细胞术及MTT法检测显示Hep-2内let-7a的表达上调会抑制喉癌细胞的增殖,促进喉癌细胞的凋亡.RT-qPCR检测显示:let-7a mRNA在空白组和阴性对照组(NC组)的表达水平明显低于实验组(P<0.05);HMGA2 mRNA在空白组、NC组的表达水平明显高于实验组(P<0.01).Western blot检测细胞中HMGA2蛋白的表达显示:实验组HMGA2蛋白的表达量明显低于空白组和NC组(P<0.01).上述实验中空白组与NC组之间比较均无统计学差异(P>0.05).结论:let-7a能够显著下调HMGA2基因和蛋白的表达,抑制喉癌细胞的增殖,促进其凋亡,为喉癌基因靶向治疗提供坚实的理论基础.

作者:马丽娟;尹娟;周恩;肖旭平

来源:现代肿瘤医学 2018 年 26卷 13期

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作者:
马丽娟;尹娟;周恩;肖旭平
来源:
现代肿瘤医学 2018 年 26卷 13期
标签:
喉癌 Hep-2细胞 miRNAlet-7a HMGA2 laryngeal carcinoma Hep-2 cell miRNA let-7a HMGA2
目的:探讨在喉癌细胞株Hep-2中上调miRNA let-7a的表达对高迁移率族蛋白(high mobility group A,HMGA2)的作用机制以及对喉癌细胞增殖的影响.方法:合成miRNA let-7a模拟体(let-7a mim-ics)并采用阳离子脂质体法转染入Hep-2内;分别用流式细胞术和MTT法检测let-7a高表达对细胞凋亡和增殖的影响;实时荧光PCR(Real-time qPCR)和Western blot检测上调let-7a后对HMGA2表达的影响.结果:本实验将let-7a mimics成功转染入Hep-2内,流式细胞术及MTT法检测显示Hep-2内let-7a的表达上调会抑制喉癌细胞的增殖,促进喉癌细胞的凋亡.RT-qPCR检测显示:let-7a mRNA在空白组和阴性对照组(NC组)的表达水平明显低于实验组(P<0.05);HMGA2 mRNA在空白组、NC组的表达水平明显高于实验组(P<0.01).Western blot检测细胞中HMGA2蛋白的表达显示:实验组HMGA2蛋白的表达量明显低于空白组和NC组(P<0.01).上述实验中空白组与NC组之间比较均无统计学差异(P>0.05).结论:let-7a能够显著下调HMGA2基因和蛋白的表达,抑制喉癌细胞的增殖,促进其凋亡,为喉癌基因靶向治疗提供坚实的理论基础.