目的 观察嘌呤霉素(PAN)对足细胞凋亡率、足细胞分子CD2相关蛋白(CD2AP)和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3 K) p85表达的影响,探讨CD2AP异常表达在足细胞凋亡中的意义.方法 体外培养小鼠肾小球足细胞系,设立对照组及PAN刺激组,处理后8h、24 h和48 h观察细胞形态并摄像,采用流式细胞仪检测足细胞凋亡率,实时荧光定量PCR检测CD2AP mRNA的表达,Western blot法检测CD2AP和PI3K p85蛋白的表达,间接免疫荧光标记在共聚焦显微镜下观察CD2AP与PI3K p85的共定位分布.结果 PAN刺激后足细胞胞体缩小,出现足突回缩至逐渐消失,失去细胞间连接;与对照组比较,PAN组足细胞24 h和48 h凋亡率[(7.52±1.35)%、(17.09±2.53)%比(4.32±0.81)%、(6.81 ±1.34)%]均明显升高,差异均有统计学意义(=4.98、8.79,P均<0.05);PAN刺激组CD2AP mRNA表达各时间点均较对照组明显降低(0.34 ±0.12、0.46±0.21、0.47 ±0.10比0.62±0.23、0.97±0.14、0.96±0.23),差异均有统计学意义(t=2.64、4.95、4.79,P均<0.05);24 h和48 h CD2AP(0.36±0.12、0.27±0.15比0.64±0.23、0.51±0.20)与PI3K p85(0.61 ±0.20、0.48±0.20比0.97±0.31、0.84±0.35)蛋白表达均显著降低,差异均有统计学意义(=2.64、2.35、2.31、2.40,P均<0.05);CD2AP在足细胞的分
作者:温捷;于力;于生友;郝志宏;张瑶;王丽娜
来源:中华实用儿科临床杂志 2014 年 29卷 5期