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目的 研究沉默DUSP1基因对急性胰腺炎(AP)小鼠促炎因子释放的调控机制.方法 设计2条DUSP1-siRNA序列和1条阴性对照序列,选择沉默效率高的DUSP1-siRNA2序列.建立AP小鼠模型,分为6组:对照组、AP组、AP+PD98059组、AP+干扰组、AP+siRNA组和AP+PD98059+siRNA组.建模成功后用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中促炎因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β 和IL-6的表达,同时检测血清淀粉酶水平.采用定量实时聚合酶链反应(qPCR)法检测胰腺组织中TNF-α、IL-1β和IL-6水平,免疫印迹法检测胰腺组织中DUSP1、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p38、p-ERK、p-JNK和p-p38的表达水平.结果 与对照组相比,其他5组血清TNF-α、IL-1β、IL-6和血清淀粉酶及组织中DUSP1、TNF-α、IL-1β、IL-6、p-ERK、p-JNK和p-p38的表达均升高,差异均有统计学意义(均P<0.05).与AP组相比,AP+PD98059+siRNA组胰腺组织中DUSP1的表达下降,差异均有统计学意义(P<0.05),AP+PD98059组血清TNF-α、IL-1β、IL-6和淀粉酶的表达下降,胰腺组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、p-ERK、p-JNK、p-p38的表达也下降,差异均有统计学意义(均P<0.05);而在DUSP1表达下降的AP+siRNA组中结果却相反.结论 沉默DUSP1基因可以激活促分裂原活化

作者:齐凤芹;张波

来源:中华实用儿科临床杂志 2018 年 33卷 19期

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作者:
齐凤芹;张波
来源:
中华实用儿科临床杂志 2018 年 33卷 19期
标签:
促分裂原活化蛋白激酶信号通路 急性胰腺炎 促炎因子 慢病毒载体 DUSP1基因 Mitogen - activated protein kinase signaling pathway Acute pancreatitis Proinflammatory cyto-kines Lentiviral vectors DUSP1 gene
目的 研究沉默DUSP1基因对急性胰腺炎(AP)小鼠促炎因子释放的调控机制.方法 设计2条DUSP1-siRNA序列和1条阴性对照序列,选择沉默效率高的DUSP1-siRNA2序列.建立AP小鼠模型,分为6组:对照组、AP组、AP+PD98059组、AP+干扰组、AP+siRNA组和AP+PD98059+siRNA组.建模成功后用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中促炎因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β 和IL-6的表达,同时检测血清淀粉酶水平.采用定量实时聚合酶链反应(qPCR)法检测胰腺组织中TNF-α、IL-1β和IL-6水平,免疫印迹法检测胰腺组织中DUSP1、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p38、p-ERK、p-JNK和p-p38的表达水平.结果 与对照组相比,其他5组血清TNF-α、IL-1β、IL-6和血清淀粉酶及组织中DUSP1、TNF-α、IL-1β、IL-6、p-ERK、p-JNK和p-p38的表达均升高,差异均有统计学意义(均P<0.05).与AP组相比,AP+PD98059+siRNA组胰腺组织中DUSP1的表达下降,差异均有统计学意义(P<0.05),AP+PD98059组血清TNF-α、IL-1β、IL-6和淀粉酶的表达下降,胰腺组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、p-ERK、p-JNK、p-p38的表达也下降,差异均有统计学意义(均P<0.05);而在DUSP1表达下降的AP+siRNA组中结果却相反.结论 沉默DUSP1基因可以激活促分裂原活化