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目的 探讨瞬时受体电位离子通道香草素受体亚家族4(transient receptor potential vanilloid receptor 4,TRPV4) 通道活化在小鼠原代培养的膀胱上皮细胞损伤中的作用及其分子机制.方法 小鼠1只,原代培养膀胱上皮细胞,并分为对照组、刺激组、β-羟基丁酸(β-hydroxybutyrate,BHB)预处理组和细胞因子释放抑制药物3(cytokine release inhibitory drug 3,MCC950)预处理组,刺激组采用TRPV4激动剂GSK1016790A 100 μmol/L进行刺激;BHB预处理组和MCC950预处理组分别给予10 mmol/L BHB和50μmol/L MCC950后采用TRPV4激动剂GSK1016790A进行刺激;对照组正常培养.4组细胞采用Calcein-AM/PI双染色法观察活细胞数和死细胞数;采用乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)细胞毒实验检测细胞LDH水平;采用Western blot法检测刺激组GSK1016790A刺激前及刺激3、6、9h时细胞Nod样受体家族含pyrin结构域蛋白3(Nod-like receptor family pyrin domain-containing protein 3, NLRP3)及其下游活化产物胱冬肽酶-1(caspase-1 p10)相对表达量.结果 刺激组Calcein-AM染色的活细胞数[(46.80±15.51)个]较对照组[(1 242.20±143.79)个]、BHB预处理组[(1 001.20±115.41)个]和MCC950预处理组[(1 144.00±138.62)个]减少(P<0.05),BHB预处

作者:张西玲;刘春来

来源:中华实用诊断与治疗杂志 2019 年 33卷 6期

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作者:
张西玲;刘春来
来源:
中华实用诊断与治疗杂志 2019 年 33卷 6期
标签:
膀胱过度活动症 瞬时受体电位离子通道香草素受体亚家族4 膀胱上皮细胞 炎性小体NLRP3 细胞损伤 小鼠
目的 探讨瞬时受体电位离子通道香草素受体亚家族4(transient receptor potential vanilloid receptor 4,TRPV4) 通道活化在小鼠原代培养的膀胱上皮细胞损伤中的作用及其分子机制.方法 小鼠1只,原代培养膀胱上皮细胞,并分为对照组、刺激组、β-羟基丁酸(β-hydroxybutyrate,BHB)预处理组和细胞因子释放抑制药物3(cytokine release inhibitory drug 3,MCC950)预处理组,刺激组采用TRPV4激动剂GSK1016790A 100 μmol/L进行刺激;BHB预处理组和MCC950预处理组分别给予10 mmol/L BHB和50μmol/L MCC950后采用TRPV4激动剂GSK1016790A进行刺激;对照组正常培养.4组细胞采用Calcein-AM/PI双染色法观察活细胞数和死细胞数;采用乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)细胞毒实验检测细胞LDH水平;采用Western blot法检测刺激组GSK1016790A刺激前及刺激3、6、9h时细胞Nod样受体家族含pyrin结构域蛋白3(Nod-like receptor family pyrin domain-containing protein 3, NLRP3)及其下游活化产物胱冬肽酶-1(caspase-1 p10)相对表达量.结果 刺激组Calcein-AM染色的活细胞数[(46.80±15.51)个]较对照组[(1 242.20±143.79)个]、BHB预处理组[(1 001.20±115.41)个]和MCC950预处理组[(1 144.00±138.62)个]减少(P<0.05),BHB预处