目的 探讨miR-34a对缺氧复氧损伤人H9C2心肌细胞凋亡的影响及可能机制.方法 对数生长期人H9C2心肌细胞,随机分为正常对照组、缺氧复氧组、miR-34a激动剂组、PI3K通道阻滞组.缺氧复氧组、miR-34a激动剂组、PI3K通道阻滞组缺氧培养3h、复氧培养4h制备缺氧复氧模型;在缺氧培养前48 h,miR-34a激动剂组于培养基中加入摩尔浓度为50 nmol/L的miR-34a激动剂agomir,PI3K通道阻滞组在培养基中加入摩尔浓度为50 nmol/L的agomir和摩尔浓度为10 μmol/L的PI3K特异性阻断剂LY294002,缺氧复氧组不作处理.正常对照组不制备模型,不进行药物干预.复氧培养4h,4组采用TUNEL法检测细胞凋亡率;实时荧光定量PCR法检测miR-34a mRNA、p-PI3K mRNA相对表达量;Western blot法检测心肌细胞caspase-3、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)蛋白、p-PI3K、p-Akt相对表达量.结果 复氧培养4h,正常对照组、miR-34a激动剂组、PI3K通道阻滞组、缺氧复氧组人H9C2心肌细胞凋亡率[(20.00±2.14)%、(34.26±3.82)%、(58.58±5.69)%、(80.25±7.76)%]依次升高(P<0.05);miR-34a激动剂组、PI3K通道阻滞组、正常对照组、缺氧复氧组人H9C2心肌细胞miR 34a mRNA(3.214±0.321、2.165±0.224、1.000±0.002、0.496±0.051)、p-PI3K mRNA(2.161±
作者:范丽;姚亚妮;李瑜
来源:中华实用诊断与治疗杂志 2020 年 34卷 3期