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目的 探讨p27kip1和Spy1在肝癌细胞HuH7增殖过程中的表达变化及相互关系.方法 采用血清饥饿合并释放处理肝癌细胞株HuH7,通过流式细胞术检测该处理对HuH7细胞生长周期的影响;同时采用Western blot、免疫荧光技术榆测不同生长状态的HuH7细胞中p27kip1和Spy1的表达及亚细胞定位情况;采用免疫沉淀方法检测HuH7细胞中p27kip1与Spy1的结合情况.结果 血清饥饿造成HuH7细胞生长周期停滞,Spy1表达下降,p27kip1蛋白总量增加,差异有统计学意义(P<0.05或<0.01).与此同时,p27kip1的阳性信号也由整个细胞分布转变为胞核高分布.而Spy1的阳性信号则由胞核高分布转变为胞浆高分布.血清释放后刺激细胞进入细胞周期,上述分子呈现相反的变化,且p27kip1的阳性信号在胞浆分布增强.结论 Spy1可能通过与p27kip1结合来介导p27kip1的核内外分布并影响其表达,从而参与调控肝癌细胞的生长.

作者:柯靖;柯青;陆牡丹;王酉;严美娟

来源:苏州大学学报(医学版) 2009 年 29卷 4期

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作者:
柯靖;柯青;陆牡丹;王酉;严美娟
来源:
苏州大学学报(医学版) 2009 年 29卷 4期
标签:
p27kip1 Spy1 肝癌 HuH7
目的 探讨p27kip1和Spy1在肝癌细胞HuH7增殖过程中的表达变化及相互关系.方法 采用血清饥饿合并释放处理肝癌细胞株HuH7,通过流式细胞术检测该处理对HuH7细胞生长周期的影响;同时采用Western blot、免疫荧光技术榆测不同生长状态的HuH7细胞中p27kip1和Spy1的表达及亚细胞定位情况;采用免疫沉淀方法检测HuH7细胞中p27kip1与Spy1的结合情况.结果 血清饥饿造成HuH7细胞生长周期停滞,Spy1表达下降,p27kip1蛋白总量增加,差异有统计学意义(P<0.05或<0.01).与此同时,p27kip1的阳性信号也由整个细胞分布转变为胞核高分布.而Spy1的阳性信号则由胞核高分布转变为胞浆高分布.血清释放后刺激细胞进入细胞周期,上述分子呈现相反的变化,且p27kip1的阳性信号在胞浆分布增强.结论 Spy1可能通过与p27kip1结合来介导p27kip1的核内外分布并影响其表达,从而参与调控肝癌细胞的生长.