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目的:探讨烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)在肾癌中的表达情况及对肾癌细胞增殖和凋亡的影响.方法:通过TCGA在线数据库ualcan分析NAMPT在肾癌组织和正常肾组织中的表达,通过Kaplan-Meier plotter数据库分析NAMPT对肾癌预后的影响.qPCR检测NAMPT基因在肾癌细胞769P、A704、786-O及正常化肾小管上皮细胞HK2中的表达.分别设计NAMPT特异性shRNA(shNAMPT组)和对照序列(scramble组)转染肾癌细胞786-O,用NAMPT抑制剂FK866及对照试剂DMSO处理肾癌细胞786-O,分别采用CCK-8法、平板克隆实验及流式细胞术检测NAMPT对肾癌细胞786-O增殖、克隆形成及凋亡的影响,NAD+/NADH检测试剂盒检测细胞内烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的含量,Western印迹检测NAMPT的表达及干扰NAMPT对磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路的影响.结果:生物信息学分析显示NAMPT在肾癌中的表达高于正常肾组织(P<0.05),NAMPT高表达组总生存率较低表达组明显降低(P<0.01);肾癌细胞769P、A704、786-ONAMPT的表达均高于肾小管上皮细胞HK2(t=6.680,P=0.0026,t=14.12,P=0.001,t=13.43,P=0.002);细胞学实验结果显示,与DMSO组相比,FK866组肾癌细胞786-O的增殖能力减弱(t=2.625,P<0.05),克隆形成能力明显受抑制(t=5.687,P<0.01),凋亡细胞比例增高(t=6.325,

作者:王艳辉;柳雅慧;任丽

来源:天津医科大学学报 2021 年 27卷 4期

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作者:
王艳辉;柳雅慧;任丽
来源:
天津医科大学学报 2021 年 27卷 4期
标签:
肾癌 NAMPT 增殖 细胞凋亡
目的:探讨烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)在肾癌中的表达情况及对肾癌细胞增殖和凋亡的影响.方法:通过TCGA在线数据库ualcan分析NAMPT在肾癌组织和正常肾组织中的表达,通过Kaplan-Meier plotter数据库分析NAMPT对肾癌预后的影响.qPCR检测NAMPT基因在肾癌细胞769P、A704、786-O及正常化肾小管上皮细胞HK2中的表达.分别设计NAMPT特异性shRNA(shNAMPT组)和对照序列(scramble组)转染肾癌细胞786-O,用NAMPT抑制剂FK866及对照试剂DMSO处理肾癌细胞786-O,分别采用CCK-8法、平板克隆实验及流式细胞术检测NAMPT对肾癌细胞786-O增殖、克隆形成及凋亡的影响,NAD+/NADH检测试剂盒检测细胞内烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的含量,Western印迹检测NAMPT的表达及干扰NAMPT对磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路的影响.结果:生物信息学分析显示NAMPT在肾癌中的表达高于正常肾组织(P<0.05),NAMPT高表达组总生存率较低表达组明显降低(P<0.01);肾癌细胞769P、A704、786-ONAMPT的表达均高于肾小管上皮细胞HK2(t=6.680,P=0.0026,t=14.12,P=0.001,t=13.43,P=0.002);细胞学实验结果显示,与DMSO组相比,FK866组肾癌细胞786-O的增殖能力减弱(t=2.625,P<0.05),克隆形成能力明显受抑制(t=5.687,P<0.01),凋亡细胞比例增高(t=6.325,