目的:研究下调microRNA(miRNA,miR)-1在H2O2诱导的心肌细胞损伤中的保护作用及其机制。方法将大鼠H9c2心肌细胞株分为4组,Blank组、NC组、H2O2组和H2O2+AS-miR-1组。Blank组不做任何处理,NC组细胞转染随机合成的miRNA阴性对照片段;H2O2组和H2O2+AS-miR-1组分别为不转染和转染miR-1 inhibitor(AS-miR-1)的H2O2细胞损伤组。采用定量PCR方法检测各组miR-1表达水平,MTT和流式细胞术检测细胞生存率和凋亡情况,利用生物信息学预测miR-1的靶基因,荧光定量PCR和Western Blot的方法检测靶基因Bcl-2的mRNA和蛋白表达情况。结果 Blank组和NC组相比较,各个指标差异均无统计学意义。H2O2组细胞的miR-1 mRNA表达水平显著升高,生存率降低,凋亡增加,Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平均明显降低。转染AS-miR-1,可以降低H2O2诱导的心肌细胞损伤,提高细胞生存率,降低细胞凋亡率,上调Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平。结论下调miR-1表达可以通过升高凋亡抑制因子Bcl-2的表达水平降低H2O2诱导的心肌细胞凋亡,发挥心肌细胞保护作用。
作者:郑君毅;蔡英;丛洪良;周津
来源:天津医药 2014 年 8期