在大肠杆菌中高效表达结核分枝杆菌Rv3369蛋白,获得纯化的重组蛋白rRv3369.通过聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)扩增Rv3369基因;以质粒pET28a为表达载体,构建重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3);以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达目的蛋白,通过SDS-PAGE鉴定rRv3369在大肠杆菌中的表达,确定rRv3369在大肠杆菌中的表达形式;采用Ni-NTA His·Bind Resin来纯化重组蛋白.重组质粒pET28a-Rv3369中目的基因测序结果与报道序列相同.分子量约19.5kDa,表达量约占菌体总蛋白的18
作者:吕冲;姜昕;顾晓玲;王洪海
来源:微生物学报 2006 年 46卷 5期