[目的]敲除副产物途径,提高重组大肠杆菌D-1,2,4-丁三醇(D-1,2,4-Butanetriol,BT)产量.[方法]利用Red重组技术敲除木糖途径xylAB基因及2-酮-3-脱氧木糖酸代谢途径的yagE及yjhH基因,考察其对重组菌生长、BT生产及副产物积累的影响.[结果]敲除xylAB基因后,重组菌生物量降低57％,BT产量降低20％,单位菌体产量提高84％,木糖酸积累量提高52％. yagE或yjhH基因单独缺失重组菌生物量分别提高10％和5％,BT产量提高36％和14％.基因共同缺失后重组菌生物量降低了21％,BT产量提高184％,达到2.44 g/L,单位菌体产量提高258％.而共同敲除两途径,生物量降低了72％,虽然单位菌体产量提高了约4倍,但BT产量仅提高43％. pH调控下,重组菌木糖酸积累量下降,BT产量进一步提高,最高达3.11 g/L.[结论]xylAB基因缺失后,虽有利于提高BT途径的效率,但由于木糖无法进入PPP途径及木糖酸积累,造成生物量降低,不利于BT合成.单独敲除yagE或yjhH后BT产量略有提高,而共同敲除这两基因更为有效地调整碳流向BT合成偏转.两途径共同敲除利于BT的合成,但由于菌体量的减少,无法大量获得BT.
作者：何姝颖；诸葛斌；陆信曜；宗红；陈雯；宋健
来源：微生物学通报 2017 年 44卷 1期
