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目的优化基因重组人突变型471 肿瘤坏死因子-α(TNF-α)工程菌的发酵和表达条件.方法通过改变培养基的组分、pH值、培养温度和诱导表达的条件等,采用测定细菌生物量和蛋白表达量等方法,确定最适的发酵和表达条件,并考察工程菌中重组质粒的遗传稳定性.结果突变型471 rhTNF-α工程菌在pH值7.5的SOC培养基中,30 ℃培养、42 ℃诱导5 h时,其表达量最大.而且,所构建的重组质粒在工程菌DH5α中传代稳定,目的蛋白的表达不受影响.结论优化了基因重组人突变型471 rhTNF-α工程菌的发酵和表达的最适条件,为进一步开发人突变型471 rhTNF-α奠定了基础.

作者:孔令洪;李瑶琛;王一理;尚宁宽;耿宜萍;司履生

来源:西安交通大学学报(医学版) 2003 年 24卷 3期

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作者:
孔令洪;李瑶琛;王一理;尚宁宽;耿宜萍;司履生
来源:
西安交通大学学报(医学版) 2003 年 24卷 3期
标签:
突变型471 rhTNF-α 发酵培养 工程菌
目的优化基因重组人突变型471 肿瘤坏死因子-α(TNF-α)工程菌的发酵和表达条件.方法通过改变培养基的组分、pH值、培养温度和诱导表达的条件等,采用测定细菌生物量和蛋白表达量等方法,确定最适的发酵和表达条件,并考察工程菌中重组质粒的遗传稳定性.结果突变型471 rhTNF-α工程菌在pH值7.5的SOC培养基中,30 ℃培养、42 ℃诱导5 h时,其表达量最大.而且,所构建的重组质粒在工程菌DH5α中传代稳定,目的蛋白的表达不受影响.结论优化了基因重组人突变型471 rhTNF-α工程菌的发酵和表达的最适条件,为进一步开发人突变型471 rhTNF-α奠定了基础.