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目的 探讨过表达脂肪非典型钙黏蛋白4(fat atypical cadherin 4,FAT4)对结直肠癌化疗耐药的影响.方法 取正常人类肠黏膜上皮细胞系FHC、人结直肠癌HCT116细胞进行培养,用实时荧光定量(real-time fluorescence quantitative analysis,RT-PCR)检测FAT4 mRNA的表达水平;过表达人结直肠癌HCT116细胞中的FAT4,细胞转染48 h后,用RT-PCR检测HCT116细胞中FAT4 mRNA的表达水平;用蛋白质印迹法检测FAT4蛋白的相对表达量;用CCK-8法检测FAT4过表达对人结直肠癌HCT116细胞增殖活性的影响,计算药物半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)、化疗耐药倍数(resistance fold,RF);用流式细胞仪检测细胞凋亡率;用免疫共沉淀(co-immuoprecipiated,Co-IP)检测FAT4与p53、鼠双微粒体基因2(mu-rine double minute2,MDM2)蛋白的相互关系;用蛋白质印迹法检测p53、磷酸化p53(phosphorylate-p53,p-p53)和MDM2蛋白的相对表达量.结果 人结直肠癌HCT116细胞中FAT4 mRNA的相对表达量为(0.36±0.12),正常人类肠黏膜上皮细胞中FAT4 mRNA的相对表达量为(1.02±0.35)(P<0.05);FAT4在结直肠癌HCT116细胞中呈低表达;对照组转染效率为89.58%,实验组为90.05%;各组细胞的增殖活性均随奥沙利铂质量浓度的增加而降低(P<0.05);

作者:杨少宾;王昱良;李俊娜;王朝杰

来源:西北药学杂志 2022 年 37卷 4期

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作者:
杨少宾;王昱良;李俊娜;王朝杰
来源:
西北药学杂志 2022 年 37卷 4期
标签:
脂肪非典型钙黏蛋白4(FAT4) 结直肠癌 化疗耐药
目的 探讨过表达脂肪非典型钙黏蛋白4(fat atypical cadherin 4,FAT4)对结直肠癌化疗耐药的影响.方法 取正常人类肠黏膜上皮细胞系FHC、人结直肠癌HCT116细胞进行培养,用实时荧光定量(real-time fluorescence quantitative analysis,RT-PCR)检测FAT4 mRNA的表达水平;过表达人结直肠癌HCT116细胞中的FAT4,细胞转染48 h后,用RT-PCR检测HCT116细胞中FAT4 mRNA的表达水平;用蛋白质印迹法检测FAT4蛋白的相对表达量;用CCK-8法检测FAT4过表达对人结直肠癌HCT116细胞增殖活性的影响,计算药物半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)、化疗耐药倍数(resistance fold,RF);用流式细胞仪检测细胞凋亡率;用免疫共沉淀(co-immuoprecipiated,Co-IP)检测FAT4与p53、鼠双微粒体基因2(mu-rine double minute2,MDM2)蛋白的相互关系;用蛋白质印迹法检测p53、磷酸化p53(phosphorylate-p53,p-p53)和MDM2蛋白的相对表达量.结果 人结直肠癌HCT116细胞中FAT4 mRNA的相对表达量为(0.36±0.12),正常人类肠黏膜上皮细胞中FAT4 mRNA的相对表达量为(1.02±0.35)(P<0.05);FAT4在结直肠癌HCT116细胞中呈低表达;对照组转染效率为89.58%,实验组为90.05%;各组细胞的增殖活性均随奥沙利铂质量浓度的增加而降低(P<0.05);