目的:研究大鼠阴道黏膜上皮细胞(RVECs)体外培养的影响因素,探索建立RVECs稳定的体外分离培养方法.方法:比较大鼠动情周期、DispaseⅡ配制方法、Dis-paseⅡ浓度、胰酶消化法及培养基对RVECs体外培养的影响.结果:动情前期的大鼠阴道上皮层更厚,消化后可获得更多RVECs；上皮层用D-KSFM配制的DispaseⅡ消化后能很好的贴壁,用PBS配制的DispaseⅡ消化后细胞贴壁欠佳；1.2U/ml DispaseⅡ的分离效果优于0.6U/ml DispaseⅡ；三步胰酶消化法比一步胰酶消化法可获得更多的贴壁细胞；RVECs在含血清培养基中生长快,但易受成纤维细胞污染.结论:动情前期的大鼠阴道组织依次经D-KSFM配制的1.2U/ml DispaseⅡ及三步胰酶消化后,在不含血清的D-KSFM中培养,可获得更多的RVECs,细胞显示上皮细胞特征.
作者：刘方方；李亚楠；张明乐；黄向华
来源：现代妇产科进展 2013 年 22卷 6期
