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目的:观察在有成骨诱导剂存在的条件下,大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞转化的能力.方法:实验于2005-07/12在锦州医学院中心实验室完成.选取清洁级2月龄SD大鼠6只,无菌条件下取双侧股骨,制备单细胞悬液.采用贴壁培养与传代结合方法分离纯化大鼠骨髓基质干细胞,将2代细胞置于含有1×10-7 mol/L地塞米松、10 mol/L β-甘油磷酸钠、50 mg/L抗坏血酸成骨诱导剂的培养基中,培养21~30 d.应用倒置显微镜观察骨髓基质干细胞与诱导后细胞形态,描绘生长曲线,流式细胞仪检测细胞周期,并用碱性磷酸酶染色和VON-KOSSA法检测成骨能力.结果:6只大鼠均进入结果分析.①骨髓基质干细胞形态学观察结果:在成骨诱导剂里细胞增殖变缓慢,呈长梭形、成纤维细胞样或不规则形.②细胞生长曲线:1~2 d为潜伏期,细胞增殖不明显;3 d后细胞增殖明显加快,进入对数生长期;6 d后增殖变慢为平台期.经计算细胞群体倍增时间为38 h.③细胞增殖周期检测结果:G0/G1期为(82.12±4.60)

作者:马云胜;秦书俭;刘树辉;曹中伟;罗美

来源:中国临床康复 2006 年 10卷 37期

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作者:
马云胜;秦书俭;刘树辉;曹中伟;罗美
来源:
中国临床康复 2006 年 10卷 37期
标签:
骨髓祖代细胞 骨生成 地塞米松 抗坏血酸
目的:观察在有成骨诱导剂存在的条件下,大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞转化的能力.方法:实验于2005-07/12在锦州医学院中心实验室完成.选取清洁级2月龄SD大鼠6只,无菌条件下取双侧股骨,制备单细胞悬液.采用贴壁培养与传代结合方法分离纯化大鼠骨髓基质干细胞,将2代细胞置于含有1×10-7 mol/L地塞米松、10 mol/L β-甘油磷酸钠、50 mg/L抗坏血酸成骨诱导剂的培养基中,培养21~30 d.应用倒置显微镜观察骨髓基质干细胞与诱导后细胞形态,描绘生长曲线,流式细胞仪检测细胞周期,并用碱性磷酸酶染色和VON-KOSSA法检测成骨能力.结果:6只大鼠均进入结果分析.①骨髓基质干细胞形态学观察结果:在成骨诱导剂里细胞增殖变缓慢,呈长梭形、成纤维细胞样或不规则形.②细胞生长曲线:1~2 d为潜伏期,细胞增殖不明显;3 d后细胞增殖明显加快,进入对数生长期;6 d后增殖变慢为平台期.经计算细胞群体倍增时间为38 h.③细胞增殖周期检测结果:G0/G1期为(82.12±4.60)