背景:研究表明,将干扰素与胸腺素α 1联合应用可增强干扰素的抗病毒作用.目的:获得既具有干扰素抗病毒活性又有胸腺素α 1增强免疫功能的双重活性重组融合蛋白.设计、时间及地点:体外对比试验,于2003-03/2004-12在重庆康尔威药业股份有限公司药物研究所完成.材料:融合基因片断由上海生工合成,人羊膜细胞、水泡性口炎病毒购自上海生化与细胞生物所,对照品IFNα1b、IFNα2a和胸腺素α1为市售药品.方法:选择大肠杆菌偏爱的密码子,将合成的胸腺素α 1与复合干扰素编码序列构成的融和基因克隆至大肠杆菌表达载体pET-22b(+)、在宿主菌BL21(DE3)-Codonplus-RP-X中表达融合蛋白.通过硫酸铵沉淀、疏水层析、阴离子交换层析、阳离子交换层析、分子筛层析等方法进行分离纯化.采用细胞病变抑制法测定融合蛋白的抗病毒活性,采用细胞增殖实验检测融合蛋白对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响.主要观察指标:重组融合蛋白抗病毒的活性和促小鼠脾淋巴细胞增殖活性.结果:①在大肠杆菌中表达的融合蛋白呈胞内可溶性表达,表达量占细菌总蛋白的20
作者：刘先俊；刘方欣；黎波；周辉云
来源：中国组织工程研究与临床康复 2009 年 13卷 24期
