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背景:伊马替尼对慢性粒细胞白血病疗效显著,但仍有部分患者对其敏感性较低.人间充质干细胞影响多种血液系统肿瘤的凋亡,但人脐带间充质干细胞是否影响伊马替尼诱导的慢性粒细胞白血病细胞的凋亡的相关研究未见报道.目的:研究人脐带间充质干细胞与伊马替尼联合应用对慢性粒细胞白血病细胞K562细胞凋亡的影响并探讨作用机制.方法:K562细胞与人脐带间充质干细胞和/或伊马替尼共培养.①分离培养人脐带间充质干细胞并鉴定;②应用流式细胞仪AnnexinV-FITC/PI双标法检测细胞凋亡率;③Western bIot检测凋亡信号通路相关蛋白Bax,BcI-2,caspase-9,caspase-3,PARP在K562细胞的表达;④应用泛caspase抑制剂Z-VAD-FMK抑制caspase信号通路活性,检测caspase凋亡信号通路在人脐带间充质干细胞联合伊马替尼诱导K562细胞凋亡中的作用.结果与结论:①体外细胞凋亡实验证实:当人脐带间充质干细胞联合伊马替尼时,K562细胞凋亡率显著增加;②Western bIot实验证明,当人脐带间充质干细胞联合伊马替尼时,促凋亡蛋白Bax表达升高,抑凋亡蛋白BcI-2表达降低,caspase凋亡信号通路相关蛋白剪切体形式cIeaved-caspase3、cIeaved-caspase9及cIeaved-PARP均表达升高;③泛caspase抑制剂Z-VAD-FMK显著抑制人脐带间充质干细胞和伊马替尼联合应用

作者:刘莹;宋宝全;魏艺萌;范会芳;余怡;董树旭;韩忠朝;马凤霞

来源:中国组织工程研究 2017 年 21卷 25期

知识库介绍

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作者:
刘莹;宋宝全;魏艺萌;范会芳;余怡;董树旭;韩忠朝;马凤霞
来源:
中国组织工程研究 2017 年 21卷 25期
标签:
干细胞 移植 慢性粒细胞白血病 间充质干细胞 Ph染色体 caspase凋亡信号通路 Bax Bcl K562细胞 酪氨酸激酶抑制剂
背景:伊马替尼对慢性粒细胞白血病疗效显著,但仍有部分患者对其敏感性较低.人间充质干细胞影响多种血液系统肿瘤的凋亡,但人脐带间充质干细胞是否影响伊马替尼诱导的慢性粒细胞白血病细胞的凋亡的相关研究未见报道.目的:研究人脐带间充质干细胞与伊马替尼联合应用对慢性粒细胞白血病细胞K562细胞凋亡的影响并探讨作用机制.方法:K562细胞与人脐带间充质干细胞和/或伊马替尼共培养.①分离培养人脐带间充质干细胞并鉴定;②应用流式细胞仪AnnexinV-FITC/PI双标法检测细胞凋亡率;③Western bIot检测凋亡信号通路相关蛋白Bax,BcI-2,caspase-9,caspase-3,PARP在K562细胞的表达;④应用泛caspase抑制剂Z-VAD-FMK抑制caspase信号通路活性,检测caspase凋亡信号通路在人脐带间充质干细胞联合伊马替尼诱导K562细胞凋亡中的作用.结果与结论:①体外细胞凋亡实验证实:当人脐带间充质干细胞联合伊马替尼时,K562细胞凋亡率显著增加;②Western bIot实验证明,当人脐带间充质干细胞联合伊马替尼时,促凋亡蛋白Bax表达升高,抑凋亡蛋白BcI-2表达降低,caspase凋亡信号通路相关蛋白剪切体形式cIeaved-caspase3、cIeaved-caspase9及cIeaved-PARP均表达升高;③泛caspase抑制剂Z-VAD-FMK显著抑制人脐带间充质干细胞和伊马替尼联合应用