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背景:miR-9在各类型肿瘤及肿瘤不同发生发展阶段的作用不一样,而对于其在甲状腺乳头状癌中的作用目前尚不清楚.目的:分析miR-9基因对甲状腺乳头状癌干细胞体外增殖及迁移能力的影响.方法:实验采用流式细胞仪从人乳头状甲状腺癌细胞中分选ALDH1阳性细胞,实时反转录PCR检测miR-9基因的表达.取对数生长期的ALDH1阳性细胞,分别转染miR-9模拟物、miR-9抑制物或miR模拟物对照,48 h后采用qRT-PCR检测miR-9转染效率,MTT实验、Tunel法、Transwel小室实验检测细胞增殖、凋亡、迁移能力,Western Blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及迁移相关蛋白基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9的表达.结果与结论:①miR-9模拟物组miR-9基因表达高于miR模拟物对照组(P<0.05),miR-9抑制物组miR-9基因表达低于miR模拟物对照组(P<0.05),说明实验转染成功;②与miR模拟物对照组比较,miR-9模拟物组细胞增殖能力和迁移能力下降,细胞凋亡增多,而miR-9抑制物组细胞增殖能力和迁移能力增强,细胞凋亡减少;③与miR模拟物对照组比较,miR-9模拟物组Bcl-2蛋白减少、Bax蛋白增多(P均<0.05),miR-9抑制物组Bcl-2蛋白增多、Bax蛋白减少(P均<0.05);④与miR模拟物对照组比较,miR-9模拟物组基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9表达减少(P<0.05),miR-9抑制物组

作者:韩菲;秦海霞

来源:中国组织工程研究 2019 年 23卷 21期

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作者:
韩菲;秦海霞
来源:
中国组织工程研究 2019 年 23卷 21期
标签:
甲状腺乳头状癌 肿瘤干细胞 ALDH1阳性细胞 miR-9 基因转染 细胞增殖 细胞迁移 细胞凋亡
背景:miR-9在各类型肿瘤及肿瘤不同发生发展阶段的作用不一样,而对于其在甲状腺乳头状癌中的作用目前尚不清楚.目的:分析miR-9基因对甲状腺乳头状癌干细胞体外增殖及迁移能力的影响.方法:实验采用流式细胞仪从人乳头状甲状腺癌细胞中分选ALDH1阳性细胞,实时反转录PCR检测miR-9基因的表达.取对数生长期的ALDH1阳性细胞,分别转染miR-9模拟物、miR-9抑制物或miR模拟物对照,48 h后采用qRT-PCR检测miR-9转染效率,MTT实验、Tunel法、Transwel小室实验检测细胞增殖、凋亡、迁移能力,Western Blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及迁移相关蛋白基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9的表达.结果与结论:①miR-9模拟物组miR-9基因表达高于miR模拟物对照组(P<0.05),miR-9抑制物组miR-9基因表达低于miR模拟物对照组(P<0.05),说明实验转染成功;②与miR模拟物对照组比较,miR-9模拟物组细胞增殖能力和迁移能力下降,细胞凋亡增多,而miR-9抑制物组细胞增殖能力和迁移能力增强,细胞凋亡减少;③与miR模拟物对照组比较,miR-9模拟物组Bcl-2蛋白减少、Bax蛋白增多(P均<0.05),miR-9抑制物组Bcl-2蛋白增多、Bax蛋白减少(P均<0.05);④与miR模拟物对照组比较,miR-9模拟物组基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9表达减少(P<0.05),miR-9抑制物组