目的 探讨线粒体融合蛋白2(MFN2)对肾癌细胞增殖的影响,并探讨其分子机制.方法 将含有MFN2编码序列的慢病毒载体(Lenti-MFN2)感染肾癌细胞株ACHN和A498(实验组),对照组为绿色荧光蛋白基因的慢病毒(Lenti-GFP).实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blotting检测转染后细胞中MFN2 mRNA及蛋白的表达及Ras-Raf1-ERK1/2信号通路蛋白磷酸化水平,流式细胞仪检测转染细胞周期.MTS法和集落形成实验检测细胞活力和增殖能力的变化.结果 对照组与实验组ACHN细胞中MFN2 mRNA的表达分别为1.04±0.29和4.11±0.78(P<0.001),A498细胞中MFN2 mRNA的表达分别为1.02±0.24和4.84±1.49(P=0.002).实验组MFN2蛋白表达显著上升,Ras-Raf1-ERK1/2信号通路蛋白磷酸化水平显著降低,细胞周期明显抑制,肾癌细胞活力和增殖能力显著下降.结论 MFN2可能通过抑制肾癌细胞中Ras-Raf1-ERK1/2信号通路蛋白磷酸化水平,抑制细胞周期的进展,导致肾癌细胞活力和增殖能力下降.
作者:黄耿;叶志华;姜卫东;毛青;桂定文
来源:中华生物医学工程杂志 2017 年 23卷 4期