目的 探讨泛素特异性肽酶10(USP10)在胰腺癌吉西他滨耐药中的作用及机制.方法 采用实验研究方法.(1) CCK8检测胰腺癌细胞系BxPC-3、PANC-1及SW1990中USP10的半抑制浓度(IC50)值.(2)Western blot检测胰腺癌细胞系BxPC-3、PANC-1、SW1990、SW1990-GEM中USP10蛋白表达水平.(3)细胞分组:将SW1990细胞进行siRNA干扰,转染对照siRNA设为对照组,转染USP10siRNA设为USP10干扰组.(4) CCK8检测对照组和USP10干扰组胰腺癌细胞中吉西他滨的IC50值.(5)克隆形成实验:计数对照组和USP10干扰组胰腺癌细胞形成的细胞克隆数,并计算克隆形成率.(6)流式细胞仪检测细胞凋亡:采用0.30 μg/mL吉西他滨分别干预对照组和USP10干预组细胞48 h.计算凋亡细胞百分比.(7)流式细胞仪检测细胞周期:采用0.3μg/mL吉西他滨分别干预对照组和USP10干预组细胞48 h,流式细胞仪检测细胞周期.(8) Western blot检测细胞相关蛋白的表达:①采用浓度为0、0.30、0.60、1.20 μg/mL的吉西他滨分别干预对照组和USP10干预组细胞72 h.检测不同浓度下两组细胞中USP10和P21蛋白表达水平.②采用浓度为0.30 μg/mL的吉西他滨分别干预对照组和USP10干预组细胞0、24、48、72 h.检测不同时间点两组细胞中USP10和P21蛋白表达水平.③检测SW1990、SW1990-GEM细胞中P53

作者：宁振；王阿曼；刘基巍；杜渐；马驰；伍远航；卢畅；谭广

来源：中华消化外科杂志 2016 年 15卷 6期