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目的 探讨小于扰RNA (small interfering ribonucleic acid,siRNA)沉默细胞凋亡信号调节激酶1(apoptosis signal-regulating kinase 1,ASK1)对脂多糖诱导的肺泡上皮A549细胞炎症反应的影响及机制.方法 利用脂多糖刺激A549细胞构建细胞炎症模型,应用脂质体转染siRNA沉默A549细胞ASK1表达,采用免疫印迹、实时荧光定量聚合酶链反应及酶联免疫吸附试验检测A549细胞ASK1、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)、白细胞介素8(interleukin 8,IL-8)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)mRNA及蛋白的表达水平.结果 通过脂多糖诱导A549细胞炎症反应,实验组炎性因子IL-6、IL-8、TNF-α表达较对照组显著增高,差异有统计学意义(P<0.001),表明构建A549细胞炎症模型成功.干扰组ASK1mRNA、蛋白表达均明显低于阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义(P<0.01),表明沉默ASK1成功.干扰组IL-6、IL-8及TNF-α mRNA表达(0.37±0.04、0.32±0.04、0.48±0.13)明显低于阴性对照组(1.04±0.11、1.22±0.19、0.93±0.14)和空白对照组(1.01±0.14、1.01±0.23、1.02±0.25),IL-6、IL-8及TNF-α蛋白表达(pg/ml)(122.6± 11.0、537.2±42.4、159.2±19.6)也明显低于阴性对照组(267.4±20.4、1 289.8±55.3、327.0±26.

作者:卢志涛;陶慧娴;洪慧;贡永健;杨远;杨洋;程锐;周晓玉;周晓光;许卫东

来源:中华新生儿科杂志(中英文) 2019 年 34卷 4期

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作者:
卢志涛;陶慧娴;洪慧;贡永健;杨远;杨洋;程锐;周晓玉;周晓光;许卫东
来源:
中华新生儿科杂志(中英文) 2019 年 34卷 4期
标签:
RNA,小分子干扰 炎症 细胞凋亡信号调节激酶1 脂多糖类 A549细胞 RNA,small interfering Inflammation Apoptosis signal-regulating kinase 1 Lipopolysaccharides A549 cells
目的 探讨小于扰RNA (small interfering ribonucleic acid,siRNA)沉默细胞凋亡信号调节激酶1(apoptosis signal-regulating kinase 1,ASK1)对脂多糖诱导的肺泡上皮A549细胞炎症反应的影响及机制.方法 利用脂多糖刺激A549细胞构建细胞炎症模型,应用脂质体转染siRNA沉默A549细胞ASK1表达,采用免疫印迹、实时荧光定量聚合酶链反应及酶联免疫吸附试验检测A549细胞ASK1、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)、白细胞介素8(interleukin 8,IL-8)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)mRNA及蛋白的表达水平.结果 通过脂多糖诱导A549细胞炎症反应,实验组炎性因子IL-6、IL-8、TNF-α表达较对照组显著增高,差异有统计学意义(P<0.001),表明构建A549细胞炎症模型成功.干扰组ASK1mRNA、蛋白表达均明显低于阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义(P<0.01),表明沉默ASK1成功.干扰组IL-6、IL-8及TNF-α mRNA表达(0.37±0.04、0.32±0.04、0.48±0.13)明显低于阴性对照组(1.04±0.11、1.22±0.19、0.93±0.14)和空白对照组(1.01±0.14、1.01±0.23、1.02±0.25),IL-6、IL-8及TNF-α蛋白表达(pg/ml)(122.6± 11.0、537.2±42.4、159.2±19.6)也明显低于阴性对照组(267.4±20.4、1 289.8±55.3、327.0±26.