目的 研究脂多糖刺激N9小胶质细胞释放炎性因子的时间和剂量效应.方法 不同剂量脂多糖刺激N9小胶质细胞,在不同时间点,酶联免疫吸附试验检测培养基中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,硝酸还原酶法检测培养基中一氧化氮(NO)水平,Western blot检测细胞质和细胞核中核转录因子-κB(NF-κB)蛋白水平.结果 刺激6、12 h后,各脂多糖组培养基中IL-1β和NO水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),刺激24 h后1 000、10 000 μg· L-1脂多糖组培养基中的IL-1β和NO水平均较对照组升高(P<0.01).刺激30 min后,各脂多糖组培养基中TNF-α水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),刺激6、24 h后,各脂多糖组培养基中TNF-α水平均较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.01),且1 000μg·L-1脂多糖组TNF-α水平最高.Westernblot检测结果显示,各脂多糖组细胞质和细胞核内NF-κB蛋白水平较对照组显著增多(P<0.01),其中1 000μg·L-1脂多糖组细胞质和细胞核中NF-κB蛋白水平最高.结论 1000 μg·L-1脂多糖是激活N9小胶质细胞诱发其炎症反应的最佳剂量,脂多糖作用6h主要促进TNF-α的释放,作用24h后则IL-1β和NO的释放明显增加.
作者:王国红;王颖;侯软玲;尹雅玲;魏林郁;李东亮
来源:新乡医学院学报 2013 年 30卷 6期