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目的 研究苹果多酚提取物(apple polyphenol extract,APE)对混合游离脂肪酸(free acid,FA)诱导的肝脏细胞脂肪变性的预防作用,并阐明其可能的作用机制.方法 以HepG2细胞为研究对象,利用FA诱导细胞内脂质沉积建立体外脂肪变性模型.CCK8测定APE对细胞的IC50,根据IC50将HepG2细胞分为四组干预24 h:(1)对照组(CON);(2)混合游离FA处理的模型组(FA);(3)低剂量APE干预组(FA+LAPE)和(4)高剂量APE干预组(FA+HAPE).利用油红O染色观察细胞内脂滴沉积情况,利用试剂盒测定细胞内脂质含量和氧化还原水平.qRT-PCR和Western blot检测脂代谢相关基因mRNA和蛋白表达水平.进一步构建SIRT1小干扰RNA后进行细胞转染,qRT-PCR和Western blot检测沉默SIRT1表达后,APE对细胞脂代谢相关基因mRNA和蛋白表达水平的影响.结果 APE干预可以预防和改善FA诱导的脂滴沉积和氧化还原状态失衡,通过激活SIRT1抑制脂肪酸合成,从而发挥调节脂代谢的作用.结论 APE可能是预防和改善肝脏脂肪变性的潜在天然物质.

作者:崔源;殷焱;李石兰;李新莉

来源:营养学报 2023 年 45卷 1期

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作者:
崔源;殷焱;李石兰;李新莉
来源:
营养学报 2023 年 45卷 1期
标签:
苹果多酚提取物 脂滴沉积 SIRT1 脂代谢 HepG2细胞
目的 研究苹果多酚提取物(apple polyphenol extract,APE)对混合游离脂肪酸(free acid,FA)诱导的肝脏细胞脂肪变性的预防作用,并阐明其可能的作用机制.方法 以HepG2细胞为研究对象,利用FA诱导细胞内脂质沉积建立体外脂肪变性模型.CCK8测定APE对细胞的IC50,根据IC50将HepG2细胞分为四组干预24 h:(1)对照组(CON);(2)混合游离FA处理的模型组(FA);(3)低剂量APE干预组(FA+LAPE)和(4)高剂量APE干预组(FA+HAPE).利用油红O染色观察细胞内脂滴沉积情况,利用试剂盒测定细胞内脂质含量和氧化还原水平.qRT-PCR和Western blot检测脂代谢相关基因mRNA和蛋白表达水平.进一步构建SIRT1小干扰RNA后进行细胞转染,qRT-PCR和Western blot检测沉默SIRT1表达后,APE对细胞脂代谢相关基因mRNA和蛋白表达水平的影响.结果 APE干预可以预防和改善FA诱导的脂滴沉积和氧化还原状态失衡,通过激活SIRT1抑制脂肪酸合成,从而发挥调节脂代谢的作用.结论 APE可能是预防和改善肝脏脂肪变性的潜在天然物质.