目的 通过抑制人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞缝隙连接蛋白43(connexin 43,cx43)基因的表达,寻找差异蛋白,初步探讨ex43基因对RPE细胞生命活动的意义.方法 提取细胞总蛋白并定量分析,第一向电泳是用DH 3～10线性IPG预制胶条进行等电聚焦,第二向电泳是用SDS-PAGE凝胶再分离蛋白.银染PAGE凝胶、干燥,Powerlook 2100XL扫描凝胶.利用Image Master 2D Elite4.01图像分析软件进行分析,蛋白斑点相对分子质量和等电点采用二维校正法确定.随机选取图像分析中siRNA转染组与RPE细胞对照组凝胶图中volume值相差≥2倍的7个蛋白质斑点进行胶内酶切,经胶上原位酶切和质谱分析得到肽质量指纹图谱,查寻蛋白质数据库并鉴定差异蛋白质,分析其生物学意义.结果 RPE细胞对照组3块凝胶共分离出蛋白质斑点861个,组间匹配率达到92
作者：司艳芳；何守志；王凤翔
来源：眼科新进展 2009 年 29卷 6期
