目的 通过体外三维培养人脉络膜黑色素瘤细胞株OCM-1,观察其生成血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)时,PI3K、EphA2蛋白的表达,探讨VM发生的可能机制.方法 体外三维培养OCM-1细胞,于三维培养7d进行过碘酸-雪夫反应(periodic acid schiff reaction,PAS)染色,观察PAS阳性的环状结构的形成(即其形成VM的能力),于1d、4d、7d进行PI3K和EphA2免疫组织化学染色并观察其结果.结果 OCM-1细胞三维培养4d,细胞大部分呈多角形,胞浆较丰富,核圆形,可见核仁,少部分肿瘤细胞长梭形,可见3～5个长梭形细胞彼此连接围咸丰环状结构.7d后,肿瘤细胞几乎均变成长梭形,沿着胶原支架生长,细胞伸出长的突起,彼此之间相互接触围成环状结构.PAS染色可见瘤细胞大多呈弥散排列,肿瘤细胞模仿机体血管生成而形成瘤细胞条索并围成管道,一层细胞外基质(PAS阳性物质)围成环状结构.与培养1d的细胞相比,培养4d和7d的PI3K和EphA2蛋白表达量均明显增加(均为P＜0.05),并随着时间的推移增加(7 d＞4 d＞1 d,P＜0.05).结论 EphA2和PI3K可能在三维培养人脉络膜黑色素瘤细胞株OCM-1的VM形成过程中具有重要作用.
作者：高文；陈陆霞；何彦津
来源：眼科新进展 2017 年 37卷 9期
