目的 通过sf9昆虫细胞表达人Autotaxin(ATX),获得具有生物学活性的目的蛋白.方法 采用TRIzol法提取人的黑色素瘤细胞总RNA,通过RT-PCR获得人ATX基因,构建pFastBacTMHTA-ATX,Bacmid-ATX重组质粒,脂质体转染sf9昆虫细胞,收获重组ATX病毒;重组病毒侵染sf9昆虫细胞表达人ATX;通过HisTrapTMHP和HiLoad 16/600 Superdex 200pg柱两部纯化获得目的蛋白并测定其磷脂酶D(ly-sophospholipase D,lysoPLD)活性.结果 用BamH I和Xho I双酶切鉴定PCR产物及重组载体的正确性,重组病毒能够侵染sf9细胞表达人ATX,柱层析纯化目的蛋白,SDS-PAGE电泳纯度95
作者：赵峰梅；潘薇薇；曹鹏程；赵亚蕊；何永吉；赵邑
来源：中国生化药物杂志 2017 年 37卷 1期
