目的 检测miR-138在年龄相关性白内障晶状体组织中的表达情况,并探讨miR-138对人晶状体上皮细胞增殖和凋亡的影响及其可能的靶基因.方法 采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测年龄相关性白内障患者(白内障组)与正常对照组中miR-138和预测靶基因沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)的表达水平.向人晶状体上皮细胞系(SRA01/04)细胞中分别转染miR-138模拟物、模拟物阴性对照物、miR-138抑制物、抑制物阴性对照物,采用RT-qPCR检测SIRT1的mRNA表达,Western blotting检测SIRT1的蛋白表达水平;转染72 h后细胞暴露于200 μmol·L-1H2O21h,Caspase-3活性检测试剂盒检测Caspase-3活性.双荧光素酶报告基因检测验证miR-138与SIRT1的靶向关系.结果 与正常对照组相比,白内障组miR-138的表达(3.64±0.19)显著升高(P <0.001),SIRT1的mRNA表达(0.32±0.06)显著下降(P <0.001);相对于模拟物阴性对照组,miR-138模拟物组的SIRT1的mRNA(0.42±0.05)及蛋白(0.46±0.05)表达水平均明显降低,Caspase-3活性(3.24±0.17)明显升高(均为P<0.05);相对于抑制物阴性对照组,miR-138抑制物组的SIRT1的mRNA(2.95±0.13)及蛋白(1.98±0.12)表达水平均明显升高,Caspas
作者:陆博;马立威;王欣玲;冯莉;江陵峰;王春霞;张劲松;阎启昌
来源:眼科新进展 2018 年 38卷 2期