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目的 探讨长链非编码RNA XIST(lncRNA XIST)对谷氨酸(Glu)诱导视网膜神经细胞损伤的分子机制.方法 原代培养视网膜神经细胞,Glu处理后建立视网膜神经细胞损伤模型.流式细胞术检测Glu对细胞凋亡能力的影响;使用试剂盒检测Glu对乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响;qRT-PCR检测Glu对lncRNA XIST、微小RNA-410(miR-410)表达水平的影响.分别将si-ln-cRNA XIST、si-con、miR-410模拟物(mimics)、miR-con转染至视网膜神经细胞,检测各组细胞凋亡率及LDH活性.双荧光素酶报告实验验证lncRNA XIST与miR-410的靶向关系;Western blot检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Cleaved Caspase-9)、核因子E2相关因子2(Nrf-2)、NADH脱氢酶1(NQO1)、血红素氧合酶1(HO-1)表达量.结果 与正常培养的视网膜神经细胞比较,Glu诱导后视网膜神经细胞凋亡率、LDH活性及细胞凋亡蛋白Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9和lncRNA XIST的表达水平均显著升高,miR-410和Nrf-2、HO-1、NQO1蛋白的表达水平均显著降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05).与阴性转染相比,转染si-lncRNA XIST后细胞凋亡率、LDH活性及Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白相对表达量均显著降低,Nrf-

作者:王丽纯;舒宝童;马宇;刘意

来源:眼科新进展 2020 年 40卷 10期

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作者:
王丽纯;舒宝童;马宇;刘意
来源:
眼科新进展 2020 年 40卷 10期
标签:
长链非编码RNA XIST 微小RNA-410 谷氨酸 视网膜神经细胞 细胞凋亡 小鼠
目的 探讨长链非编码RNA XIST(lncRNA XIST)对谷氨酸(Glu)诱导视网膜神经细胞损伤的分子机制.方法 原代培养视网膜神经细胞,Glu处理后建立视网膜神经细胞损伤模型.流式细胞术检测Glu对细胞凋亡能力的影响;使用试剂盒检测Glu对乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响;qRT-PCR检测Glu对lncRNA XIST、微小RNA-410(miR-410)表达水平的影响.分别将si-ln-cRNA XIST、si-con、miR-410模拟物(mimics)、miR-con转染至视网膜神经细胞,检测各组细胞凋亡率及LDH活性.双荧光素酶报告实验验证lncRNA XIST与miR-410的靶向关系;Western blot检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Cleaved Caspase-9)、核因子E2相关因子2(Nrf-2)、NADH脱氢酶1(NQO1)、血红素氧合酶1(HO-1)表达量.结果 与正常培养的视网膜神经细胞比较,Glu诱导后视网膜神经细胞凋亡率、LDH活性及细胞凋亡蛋白Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9和lncRNA XIST的表达水平均显著升高,miR-410和Nrf-2、HO-1、NQO1蛋白的表达水平均显著降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05).与阴性转染相比,转染si-lncRNA XIST后细胞凋亡率、LDH活性及Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白相对表达量均显著降低,Nrf-