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目的:肾间质纤维化( renal interstital fibrosia , RIF)的核心是肾小管上皮细胞转分化。探讨促红细胞生成素(Erythropoietin, EPO)对高糖诱导的正常人肾小管上皮细胞(human kidney cells, HK-2)转分化的影响及其可能机制。方法体外培养HK-2细胞,按随机数字表法分为空白对照组、高糖诱导组(高糖终浓度30 mmol/L)、甘露醇对照组(甘露醇浓度24.5 mmol/L)、EPO对照组( EPO终浓度为20 U/mL)、5 U/mL EPO干预组、10 U/mL EPO干预组、20 U/mL EPO干预组及ROCK抑制剂( Y27632)组( Y27632终浓度为30μmol/L,加入Y2763230 min后加高糖,高糖终浓度为30 mmol/L),各组均刺激24 h。应用RT-PCR法检测细胞 RhoA mRNA、ROCK1 mRNA 的水平;细胞免疫荧光法检测细胞 E-钙黏蛋白、α-平滑肌肌动蛋白(αsmoothmuscleactin,α-SMA)的表达;ELISA法检测上清液纤维连接蛋白(fibronectin, FN)的表达。结果 RT-PCR结果显示高糖诱导组RhoA mRNA及ROCK1 mRNA表达较空白对照组显著升高(1.400±0.022 vs 0.945±0.132,1.913±0.011 vs 1.007±0.002,P<0.05);5、10、20 U/mL EPO干预组,RhoA mRNA的表达水平(0.278±0.006、0.770±0.005、0.334±0.009)均较空白对照组(0.945±

作者:陈艳霞;秦晓华;房向东;黄翀;涂卫平

来源:医学研究生学报 2014 年 10期

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作者:
陈艳霞;秦晓华;房向东;黄翀;涂卫平
来源:
医学研究生学报 2014 年 10期
标签:
红细胞生成素 高糖 转分化 RhoA/ROCK信号通路 Erythropoietin High glucose Epithelial-mesenchymal transition RhoA/ROCK signaling pathway
目的:肾间质纤维化( renal interstital fibrosia , RIF)的核心是肾小管上皮细胞转分化。探讨促红细胞生成素(Erythropoietin, EPO)对高糖诱导的正常人肾小管上皮细胞(human kidney cells, HK-2)转分化的影响及其可能机制。方法体外培养HK-2细胞,按随机数字表法分为空白对照组、高糖诱导组(高糖终浓度30 mmol/L)、甘露醇对照组(甘露醇浓度24.5 mmol/L)、EPO对照组( EPO终浓度为20 U/mL)、5 U/mL EPO干预组、10 U/mL EPO干预组、20 U/mL EPO干预组及ROCK抑制剂( Y27632)组( Y27632终浓度为30μmol/L,加入Y2763230 min后加高糖,高糖终浓度为30 mmol/L),各组均刺激24 h。应用RT-PCR法检测细胞 RhoA mRNA、ROCK1 mRNA 的水平;细胞免疫荧光法检测细胞 E-钙黏蛋白、α-平滑肌肌动蛋白(αsmoothmuscleactin,α-SMA)的表达;ELISA法检测上清液纤维连接蛋白(fibronectin, FN)的表达。结果 RT-PCR结果显示高糖诱导组RhoA mRNA及ROCK1 mRNA表达较空白对照组显著升高(1.400±0.022 vs 0.945±0.132,1.913±0.011 vs 1.007±0.002,P<0.05);5、10、20 U/mL EPO干预组,RhoA mRNA的表达水平(0.278±0.006、0.770±0.005、0.334±0.009)均较空白对照组(0.945±