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目的 α1肾上腺素能受体(α1-AR)介导的交感神经通路与心肌重构及纤维化病理过程中的心房钠尿肽(ANP)和脑钠肽(BNP)表达及其活性调节密切相关.文章观察α1-AR激动剂苯肾上腺素(PE)对ANP、BNP表达的影响,初步探讨作用机制及其与钙调神经磷酸酶-T细胞转录活化因子3(CaN-NFATc3)、丝裂原活化蛋白激酶MEK3-丝裂原活化蛋白激酶P38(MEK3-P38 MAPK)相关信号通路的关系.方法 体外分离培养SD大鼠乳鼠心肌细胞(CMs),细胞培养72 h后分为5组进行实验:对照组、PE组、Praz+PE组、CsA+PE组、SB203580+PE组.其中预处理组中CsA、Praz以及SB203580先单独孵育细胞1 h,后用PE(50μmol/L)继续作用5 h,共6 h;PE组仅用单药持续处理6 h.药物处理后,镜下观察心肌细胞状态,并运用锥虫蓝计数及MTT法测定各组CMs增殖,比色法测定干预后的各组心肌细胞活力;低温裂解细胞提取细胞蛋白,运用免疫印迹法定量测定前体钠尿肽(proANP)、前体脑钠肽(proBNP)、CaN及p-P38MAPK蛋白在各组细胞中的表达;以ELISA法测定各组细胞NFATc3、MEK3蛋白含量.结果 Praz+PE组细胞排列稀疏,细胞核固缩,光镜下未见细胞规律跳动,状态较差;CsA+PE组细胞异形化,边缘光亮,细胞呈纤维条索状;SB203580+PE组细胞细胞质淡染,细胞核少量碎片化,换液时可见较多漂浮死亡细胞.

作者:罗瑞娣;王忠;李茹茹

来源:医学研究生学报 2018 年 31卷 9期

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作者:
罗瑞娣;王忠;李茹茹
来源:
医学研究生学报 2018 年 31卷 9期
标签:
苯肾上腺素 心房钠尿肽 脑钠肽 钙调神经磷酸酶 丝裂原活化蛋白激酶P38
目的 α1肾上腺素能受体(α1-AR)介导的交感神经通路与心肌重构及纤维化病理过程中的心房钠尿肽(ANP)和脑钠肽(BNP)表达及其活性调节密切相关.文章观察α1-AR激动剂苯肾上腺素(PE)对ANP、BNP表达的影响,初步探讨作用机制及其与钙调神经磷酸酶-T细胞转录活化因子3(CaN-NFATc3)、丝裂原活化蛋白激酶MEK3-丝裂原活化蛋白激酶P38(MEK3-P38 MAPK)相关信号通路的关系.方法 体外分离培养SD大鼠乳鼠心肌细胞(CMs),细胞培养72 h后分为5组进行实验:对照组、PE组、Praz+PE组、CsA+PE组、SB203580+PE组.其中预处理组中CsA、Praz以及SB203580先单独孵育细胞1 h,后用PE(50μmol/L)继续作用5 h,共6 h;PE组仅用单药持续处理6 h.药物处理后,镜下观察心肌细胞状态,并运用锥虫蓝计数及MTT法测定各组CMs增殖,比色法测定干预后的各组心肌细胞活力;低温裂解细胞提取细胞蛋白,运用免疫印迹法定量测定前体钠尿肽(proANP)、前体脑钠肽(proBNP)、CaN及p-P38MAPK蛋白在各组细胞中的表达;以ELISA法测定各组细胞NFATc3、MEK3蛋白含量.结果 Praz+PE组细胞排列稀疏,细胞核固缩,光镜下未见细胞规律跳动,状态较差;CsA+PE组细胞异形化,边缘光亮,细胞呈纤维条索状;SB203580+PE组细胞细胞质淡染,细胞核少量碎片化,换液时可见较多漂浮死亡细胞.